[发明专利]用于处理畜禽废物的复合发酵菌剂及其制备方法和应用有效
申请号: | 201210542259.X | 申请日: | 2012-12-14 |
公开(公告)号: | CN103074228A | 公开(公告)日: | 2013-05-01 |
发明(设计)人: | 吴祖芳;翁佩芳;毕泗伟;钟仁方 | 申请(专利权)人: | 宁波大学 |
主分类号: | C12N1/00 | 分类号: | C12N1/00;C12N1/20;A01K1/015;C12R1/01;C12R1/07 |
代理公司: | 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 | 代理人: | 程晓明 |
地址: | 315211 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 处理 畜禽 废物 复合 发酵 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于处理畜禽废物的复合发酵菌剂,其特征在于:所述的复合发酵菌剂的活性组分为芽孢杆菌(Bacillus beringensis)保藏号为CGMCC No.6611、嗜硫红细菌(Rhodobacter sulfidophilus)保藏号为CGMCC No.6613和纤维单胞菌(Cellulomonas sp.)保藏号为CGMCC No. 6612,所述的芽孢杆菌、所述的嗜硫红细菌和所述的纤维单胞菌的菌种按质量比0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5的比例混合。
2.一种制备如权利要求1所述的微生物复合发酵菌剂的方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)斜面菌种培养
将芽孢杆菌(Bacillus beringensis)保藏号为CGMCC No.6611、嗜硫红细菌(Rhodobacter sulfidophilus)保藏号为CGMCC No.6613和纤维单胞菌(Cellulomonas sp.)保藏号为CGMCC No. 6612分别接于相应的斜面培养基上,在pH 为5.8-7.2,温度为28-37 ℃的条件下静置培养33-96小时,放入4℃冰箱保存;
(2)液体种子扩大培养
分别挑取2至3环斜面菌种培养后得到的芽孢杆菌、嗜硫红细菌和纤维单胞菌于相应的液体培养基中,在26-30℃的条件下摇床培养24-48小时,进行液体种子扩大培养,得到芽孢杆菌菌液、嗜硫红细菌菌液、纤维单胞菌菌液;
(3)固体种子扩大培养
将芽孢杆菌菌液、嗜硫红细菌菌液、纤维单胞菌菌液按质量比为0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5的比例混合均匀,制成复合菌液,将所述的复合菌液按质量体积百分比4-5%的接种量将其接入到固体扩大培养基中,在温度为28-37℃的条件下,培养时间33-96小时,即得到复合发酵菌剂。
3.根据权利要求2所述的微生物复合发酵菌剂的制备方法,其特征在于:步骤(1)中芽孢杆菌的斜面培养基的配制方法为:将胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g、琼脂15-20g依次加入适量水中,煮沸,补水至1000mL,用NaOH调节pH至7.2,0.1MPa灭菌15-20min即可。
4.根据权利要求2所述的微生物复合发酵菌剂的制备方法,其特征在于:步骤(1)中嗜硫红细菌的斜面培养基的配制方法为:将乙酸钠3.0g,氯化铵1.0g,NaCl1.0g,K2HPO40.5g,KH2PO40.5g,MgSO40.5g,CaCl20.05g,酵母膏2.0g,琼脂15-20g依次加入适量水中,煮沸,补水至1000mL,调节pH至 6.8,0.07MPa灭菌20min即可。
5.根据权利要求2所述的微生物复合发酵菌剂的制备方法,其特征在于:步骤(1)中纤维单胞菌的斜面培养基的配制方法为:将可溶性淀粉20g,KNO3 1g,K2HPO4 0.5g,MgSO4· 7H2O 0.5g,NaCl 0.5g,FeSO4· 7H2O 0.01g,琼脂15-20g 依次加入适量水中,煮沸,补水至1000mL,调节pH至7.4-7.6,0.1MPa灭菌15-20min即可。
6.根据权利要求2所述的微生物复合发酵菌剂的制备方法,其特征在于:步骤(2)中芽孢杆菌的液体培养基的配制方法为:称取10g玉米淀粉和5g黄豆粉,加入1000mL蒸馏水煮沸20min,纱布过滤后,取滤液补加蒸馏水至1000mL,调节pH至7.2,0.1MPa灭菌15-20min即可。
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