[发明专利]一种鸡新城疫、传染性支气管炎病毒同胚增殖的培养方法有效
| 申请号： | 201210545895.8 | 申请日： | 2012-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN103013930A | 公开（公告）日： | 2013-04-03 |
| 发明（设计）人： | 孟照洁;宫玉珍;杨灵芝 | 申请（专利权）人： | 山东滨州沃华生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12N7/02 |
| 代理公司： | 济南舜源专利事务所有限公司 37205 | 代理人： | 张建成 |
| 地址： | 256606 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 新城 传染性 支气管炎 病毒 增殖 培养 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种鸡新城疫、传染性支气管炎病毒同胚增殖的培养方法，其特征在于培养方法及步骤如下：
（1）将新城疫毒种LaSota株毒种稀释成106EID50，传染性支气管炎毒株M41株用PBS液稀释成103EID50，稀释后将两种病毒液以1:1的比例混合;
（2）将混合后毒种接种至11日龄易感鸡胚尿囊内，每胚接种尿囊腔0.15ml，接种后用蜡封接种孔和气孔；
（3）将接种后鸡胚放到培养箱，在36.5℃下进行孵化；
（4）72小时前每24小时照胚一次，72小时后每6小时照胚一次，弃去72h前的死亡胚，留下72-96h时间段的死亡胚和96h的活胚，在2-8℃环境下冷却12h，将冷却的鸡胚取出，放入收胚室，将蛋壳的气室部位用碘酒消毒后，以无菌手术剥去气室部位的蛋壳，将蛋壳膜，用尖头小镊子将绒毛尿囊膜及羊膜撕破，检查胚液是否浑浊或有异物，如果没有则抽取胚液，收集，即得鸡新城疫、传染性支气管炎抗原。
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