[发明专利]一种细胞荧光标记方法有效
| 申请号： | 201210547974.2 | 申请日： | 2012-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN103076312A | 公开（公告）日： | 2013-05-01 |
| 发明（设计）人： | 蔡林涛;张鹏飞;刘淑慧;高笃阳;盛宗海;胡德红;龚萍 | 申请（专利权）人： | 深圳先进技术研究院 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 | 代理人： | 宋鹰武 |
| 地址： | 518055 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 荧光 标记 方法 | ||
1.一种细胞荧光标记方法，包括以下步骤：
A．使细胞与点击化学修饰连接剂结合：在含有细胞的培养液中，添加带有环炔基的点击化学修饰连接剂，室温反应，得到细胞-点击化学修饰连接剂复合培养液，其中点击化学修饰连接剂的量为细胞摩尔量的10-100倍；
B．使用叠氮-荧光量子点复合物对细胞进行荧光标记：将叠氮-荧光量子点复合物加入步骤A得到的培养液中，室温孵育，得到荧光量子点标记的生物体培养液，其中叠氮-荧光量子点复合物的量为细胞摩尔量的10-100倍。
2.根据权利要求1所述的细胞荧光标记方法，其特征在于，步骤A中反应30-60分钟。
3.根据权利要求1所述的细胞荧光标记方法，其特征在于，步骤B中孵育30-60分钟。
4.根据权利要求1所述的细胞荧光标记方法，其特征在于，步骤A还包括用pH为7.2-7.6的缓冲液洗涤，以去除多余的点击化学修饰连接剂，及/或离心收集细胞的操作。
5.根据权利要求1所述的细胞荧光标记方法，其特征在于，步骤B还包括用pH为7.2-7.6的缓冲液洗涤，以去除多余的叠氮-荧光量子点复合物，及/或离心收集荧光量子点标记的细胞的操作。
6.根据权利要求4或5所述的细胞荧光标记方法，其特征在于，所述缓冲液为PBS缓冲液或者HEPES缓冲液。
7.根据权利要求1所述的细胞荧光标记方法，其特征在于，所述点击化学修饰试剂为下式的化合物：
8.根据权利要求1所述的细胞荧光标记方法，其特征在于，所述叠氮-荧光量子点复合物中的量子点选自CdSe、CdTe、CdS、ZnS、CuInSe、CuInS、InP、CdSe/ZnS、CdTe/CdS、CdTe/CdSe，或它们的组合。
9.根据权利要求8所述的细胞荧光标记方法，其特征在于，所述叠氮-荧光量子点复合物采用下式的叠氮修饰剂对量子点进行修饰：
10.根据权利要求1所述的细胞荧光标记方法，其特征在于，所述培养液为DMEM培养液。
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