[发明专利]一种超低分肝素钠工艺研究

权利要求书

1.一种超低分肝素钠工艺研究，其特征在于：采用多次氧化和沉淀逐级分离，得到分子量在2000-3000道尔顿，效价在10-40U/mg的超低分子肝素钠。

2.根据权利要求1所述的一种超低分肝素钠工艺研究，其特征包括如下步骤：

一、提取

(1)、粗品溶解：

开启水阀，加入一定量饮用水，再将回收的肝素钠粗品(效价在10-20usp/mg)加入到反应罐中，边搅边加，按原料与饮用水1∶(6-7)比例溶解，搅拌5-10小时至全部溶解；

(2)、酶解：

将上一步溶解液，先用盐酸溶液调PH7.0-8.0，升温至50-55℃之间时加入胃蛋白酶5-10g/亿单位，再加入50g/亿单位胰酶，50-55℃保温4小时；

(3)、急升温：

将上一步酶解液在1小时内升温至85-90℃，静止10-30分钟，开搅拌，通入循环水降温，待温度降至50-55℃时，用2-6mol/L氢氧化钠溶液调PH10.0-12.0，静止分层20-30小时；

(4)、底部沉淀的杂质离心：

虹吸上清，用40-100目滤袋过滤，过滤后的溶液分为上清液和下层沉淀，留上清液待沉淀，下层沉淀放离心机离心，离心后留上层离心液；

二、精制

(1)、第一次沉淀：

待上述上清液和离心液温度降至20-30℃，加入20-30g/L氯化钠，搅拌溶解后，用盐酸将滤液调PH10.0-12.0，边搅边加浓度为95～97％的乙醇溶液，使得乙醇的浓度在20℃时达到50％，沉淀15小时；

(2)、第一次氧化：弃去上层废乙醇，下层沉淀物用纯化水溶解，用氢氧化钠 溶液将溶液调PH10.0-12.0，然后加入体积10％双氧水，氧化15小时；

(3)、第二次沉淀：溶液加入20-30g/L氯化钠，搅拌溶解后，用盐酸溶液调将溶液PH6.0-7.0，边搅边加浓度为95～97％的乙醇溶液，使得乙醇的浓度在20℃时达到50％，沉淀15小时；

(4)、第二次氧化：弃去上层废乙醇，下层沉淀物用纯化水溶解，用氢氧化钠溶液将溶液调PH10.0-12.0，然后加入体积10％双氧水，氧化15小时；

(5)、第三次沉淀：溶液加入20-30g/L氯化钠，用盐酸溶液将溶液调PH10.0-12.0，边搅边加浓度为95～97％的乙醇溶液，使得乙醇的浓度在20℃时达到45～50％，沉淀15小时；

(6)、第三次氧化：弃去上层废乙醇，下层沉淀物用纯化水溶解，用氢氧化钠溶液将溶液调PH10.0-12.0，然后加入体积10％双氧水，氧化15小时；

(7)、第四次沉淀：溶液加入20-30g/L氯化钠，搅拌溶解后，用盐酸溶液调将溶液PH6.0-7.0，边搅边加浓度为95～97％的乙醇溶液，使得乙醇的浓度在20℃时达到50％，沉淀15小时；

(8)、第四次氧化：弃去上层乙醇，下层沉淀物用纯化水溶解，用氢氧化钠溶液将溶液调PH10.0-12.0，然后加入体积10双氧水，氧化15小时；

(9)、溶液加入20-30g/L氯化钠，用盐酸溶液将溶液调PH10.0-12.0，边搅边加浓度为95～97％的乙醇溶液，使得乙醇的浓度在20℃时达到50％，沉淀15小时；

(10)、将沉淀物用纯化水按2-5L/亿单位溶解后，用孔径0.22-0.3微米滤膜板框机微滤，用乙醇沉淀，使乙醇浓度达75-80％，再加入23-26％的氯化钠溶液，每1升溶液加6-10ml氯化钠溶液，静止沉淀10-12小时；

(11)、将上层乙醇弃去，加入无水乙醇脱水，边搅边加，使乙醇浓度为97-99％，静止24-30小时，弃去上层乙醇，将不锈钢砂芯棒放在产品中，用真空泵通过管道和过滤瓶把剩余乙醇抽干，待干燥；

(12)、将抽干的产品均匀放置在不锈钢盘中，放在真空干燥箱中抽真空，用 循环水加温，温度35-60℃，烘干70-80小时；

(13)、包装：将产品取出，称重，使每包装袋5kg，用封口机封口，放在铝桶中待验。

3.根据权利要求2所述的一种超低分肝素钠工艺研究，其特征在于：第四次沉淀后的溶液进行QA取样化验，测吸光度：260nm＜0.2；400nm＜0.03；分子量2000-3000道尔顿，若不合格，继续重复上面过程，若合格移交下一工序。