[发明专利]去氧肾上腺素的生物素衍生物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种去氧肾上腺素的生物素衍生物，结构式如下：

其中n=25-60。

2.权利要求1化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）双异端基聚乙二醇的合成：

在干燥密封的反应瓶中，加入体积比为1∶1.5-1∶2.1的六甲基二硅基胺基钾和环氧乙烷，用有机溶剂溶解，搅拌，冰浴反应15-25小时，然后加入六甲基二硅基胺基钾物质的量的0.3-0.6倍的丁二酸酐，继续反应5-6个小时，最后加入过量冰醋酸，避光搅拌反应3-4个小时，将反应液滴入乙醚中沉降即得到双异端基聚乙二醇固体；

（2）去氧肾上腺素的哌嗪衍生物的合成：

将去氧肾上腺素的氨基进行保护，然后与对甲苯磺酸乙二醇二酯以摩尔比为1∶5-1∶9的比例在有机溶剂中反应，最后与六水哌嗪在氨基保护的去氧肾上腺素物质的量的25-30倍的二氧六环中以摩尔比为1∶2-1∶3进行反应，将去氧肾上腺素连接到哌嗪的一端；

（3）去氧肾上腺素哌嗪衍生物的生物素化的合成：

将双异端基聚乙二醇、生物素的衍生物、DMAP按质量比为30-35∶4-5∶1加入到封闭干燥的反应瓶中，有机溶剂溶解，40℃水浴中避光、搅拌反应35-50小时，然后加入与生物素的衍生物同质量的二环己基碳二亚胺反应15-25小时；向反应液中加入与二环己基碳二亚胺同质量的N-羟基琥珀酰亚胺，40℃水浴中避光、搅拌反应30-40小时；然后继续向反应液中加入与N-羟基琥珀酰亚胺同等物质的量的去氧肾上腺素哌嗪衍生物，40℃水浴中避光、搅拌反应30-40小时；最后加入与N-羟基琥珀酰亚胺同等物质的量的三氟乙酸，搅拌反应1-2个小时以去掉氨基保护基团，将反应液逐滴滴入乙醚中沉降，即得到固体产物。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）和（3）中所述的双异端基聚乙二醇为一端氨基，一端羧基的聚乙二醇NH₂-PEG-COOH。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述的有机溶剂为无水四氢呋喃。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）和（3）中，将反应液滴入乙醚中沉降三次，得到的固体在40℃下真空干燥15-25小时。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中将去氧肾上腺素的氨基用二碳酸二叔丁酯进行保护；所述的有机溶剂依次为N，N’-二甲基甲酰胺和二氧六环。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述的有机溶剂为双异端基聚乙二醇质量的3%的无水二甲基亚砜；所述的生物素的衍生物为N-羟基琥珀酰亚胺生物素酯。

8.权利要求1所述的去氧肾上腺素的生物素衍生物作为荧光探针的应用。