[发明专利]季也蒙毕赤酵母发酵酒糟水解液生产木糖醇的方法

权利要求书

1.一种季也蒙毕赤酵母发酵酒糟水解液生产木糖醇的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）制备酒糟水解液

将烘干后的酒糟粉碎至粒径40目， 按1:5的比例（w/v）与0.1%的NaOH溶液混合，搅拌下加热煮沸l h，冷却后用滤布过滤，弃去滤液，用清水洗涤滤渣，再将滤渣与1000 mL水共煮l h，过滤，除去灰分后的滤渣留待下步水解；采用由1%HCl和1% H₃PO₄所组成的混合酸水解酒糟，水解温度100℃，固液比1:10（w/v），水解2 h；水解液85℃浓缩至木糖含量40 g/L，再以1:10的比例（w/v）加入活性炭脱色；用石灰乳中和至pH 5.0，抽滤去除Ca₃(PO₄)₂沉淀后，所得水解液于4℃冷藏备用；

（2）培养基配制

YPD培养基：配制YPD斜面培养基，用于菌种的活化；

种子培养基：含木糖20g/ L的原始酒糟水解液100mL，酵母膏10 g/L，蛋白胨20 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.2 g/L，KH₂PO₄ 5g/L， pH5.5，110℃灭菌20 min；

发酵培养基：含木糖40g/L 的90mL浓缩酒糟水解液中，补加10 mL有机氮源溶液，有机氮源溶液为酵母膏10g/L及蛋白胨20g/L；起始pH5.0，110℃灭菌20 min；

（3）木糖醇发酵

斜面培养：将季也蒙毕赤酵母菌种接种于YPD试管斜面上；

液体种子培养：取斜面菌种1环，接入液体种子培养基中， 250mL三角瓶装种子培养基液量50 mL，于28℃，摇床200 r /min培养24 h，以使毕赤酵母适应酒糟水解液环境；

摇瓶发酵：将液体种子接种至发酵培养基中，摇瓶培养的最优工艺为：装液量为1/5；接种量5% ，温度为28 ℃，转速为180 r/min，发酵48 h结束，制得含木糖醇的发酵液;

用高效液相色谱仪测定，得出保留时间和色谱峰面积，测得木糖醇的含量。

2.根据权利要求1所述的季也蒙毕赤酵母发酵酒糟水解液生产木糖醇的方法，其特征在于：所述的采用高效液相色谱仪测定时色谱条件为：Thermo-NH₂柱；柱温：常温；流动相：乙腈：水=85：15；流速：1mL/min；示差折光检测器检测，进样量为20μL。