[发明专利]一种用于多种肿瘤诊断的抗体芯片试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，尤其涉及一种用于多种肿瘤诊断的抗体芯片试剂盒。

背景技术

21世纪以来，恶性肿瘤对人类健康的威胁已日趋严重。其致死率仅次于心脑血管疾病，位居第三。肿瘤患者死亡率高的主要原因是不能准确诊断，准确诊断与及时治疗是防治肿瘤与降低死亡率的最有效方法。

随着肿瘤细胞的发生，肿瘤患者体内某些蛋白质会发生变化，或产生新的与肿瘤关联的异常蛋白。这些能反应肿瘤存在的化学类物质人们总称为肿瘤标志物。由于肿瘤标志物或不存在于正常成人组织而仅见于肿瘤组织，或在肿瘤组织中的含量大大超过在正常组织里的含量，它们的存在或量变可以提示肿瘤的性质，因此通过对这些异常的蛋白质的检测不仅可以用来诊断肿瘤的发生也可以用来监控药物对肿瘤的治疗进展，对肿瘤的诊治将起到重要作用。用于临床诊断的肿瘤标志物包括癌胚抗原、酶、激素、糖蛋白、癌基因和细胞表面肿瘤抗原等6大类。美国FDA批准了以下血清肿瘤标志物用于肿瘤的辅助诊断：甲胎蛋白（AFP），癌胚抗原（CEA），癌抗原CA125，癌抗原CA19-9，癌抗原CA153，前列腺特异性抗原（fPSA，tPSA），甲状腺球蛋白（Thyroglobulin），β人绒毛膜促性腺激素（HCGb），和人附睾分泌蛋白4（HE4）。另外其他常用于临床诊断的肿瘤标志物还包括神经原特异性烯醇化酶（NSE），降钙素（PCT），铁结合蛋白（Ferritin），β2－微球蛋白（beta 2-Microglobin），胃蛋白酶原（Pepsinogen 1，2），和催乳素（Prolactin）等。

甲胎蛋白（AFP）在胚胎期是功能蛋白，合成于卵黄囊、肝和小肠。AFP是原发性肝癌的目前比较灵敏、特异的肿瘤标志。睾丸癌、畸胎瘤、胃癌、胰腺癌等患者血清AFP含量可以升高。癌胚抗原（CEA）一度被认为是结肠癌的特异性标志物，但以后发现胰腺癌、胃癌、肺癌和乳腺癌也有较高表达。癌抗原CA125是卵巢癌的首选标志物，在胰腺癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、胃肠道恶性肿瘤、子宫癌均可增高。附睾分泌蛋白4（HE4）是卵巢癌第二标志物，辅助卵巢癌的诊断。癌抗原CA153是乳腺癌的首选标志，另外在肺癌、卵巢癌，肺腺癌、结直肠癌等均可增高。癌抗原CA19-9为消化道癌相关抗原，是胰腺癌和结、直肠癌的标志物。前列腺特异性抗原（PSA、f-PSA）是前列腺癌的特异性标志物，也是目前少数器官特异性肿瘤标志物之一。神经原特异性烯醇化酶NSE是神经母细胞瘤和小细胞肺癌的标记物，也是中枢神经系统的肿瘤标记物。人绒毛膜促性腺激素（hCG）是胎盘产生的一种糖蛋白类激素，主要见于妇科肿瘤和非精原性睾丸癌，其他如乳腺癌、精原性睾丸癌、肺癌、肝癌等有20－40％的阳性率。铁结合蛋白（Ferritin）与白血病、肺癌、乳腺癌有关。现被称为原发性肝癌的第二血清学标志物，特别是对AFP阴性患者。β2－微球蛋白（β2-microglobulin）临床上多用于证实淋巴增殖性疾病，如白血病、淋巴瘤及多发性骨髓瘤。另外根据表达水平的不同还可为骨髓瘤患者分期。降钙素（PCT）是甲状腺髓样癌、肺腺癌及小细胞肺癌的标志物，另外在乳腺癌、肝癌、肾癌、前列腺癌、胰腺癌、上颌窦癌、膀胱癌中也有高表达。

目前常用的肿瘤标志物的检测方法主要包括：酶联免疫吸附法（ELISA），放射免疫分析（radio immunoassay，RIA），免疫印迹法（western blot），流式细胞仪（Flow-Cytometry）等。其中，酶联免疫吸附法是最普遍的方法，具灵敏度高、特异性较好、操作简便等优点。但一次试验只能检测单一指标，通量低、成本高，在多肿瘤标志物的检测中，该方法存在明显的不足；放射免疫分析（RIA）虽然灵敏度高，是由于具有放射性污染，现在已很少采用；免疫印绩法能测定分子的大小，且无非特异的反应，但操作繁琐，灵敏度低，且只能检测单一指标；流式细胞仪能在细胞水平上检测肿瘤标志物的水平，但却存在低灵敏、低通量、高成本等缺点，且此方法中采用的设备结构复杂，不易推广。