[发明专利]6条寡核苷酸序列及其应用无效
申请号: | 201210552569.X | 申请日: | 2012-12-17 |
公开(公告)号: | CN103060326A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 郑江;汤学敏;李玉宝 | 申请(专利权)人: | 集美大学 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 厦门南强之路专利事务所 35200 | 代理人: | 马应森 |
地址: | 361021 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 寡核苷酸 序列 及其 应用 | ||
1.6条寡核苷酸序列,其特征在于包括SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6共6条寡核苷酸序列,且采用其中一条就能完成灭活溶藻弧菌的识别检测;
所述SEQ ID No.1可记为“#7适配子”,所述SEQ ID No.2可记为“#14适配子”,所述SEQ ID No.3可记为“#23适配子”,所述SEQ ID No.4可记为“#4适配子”,所述SEQ ID No.5可记为“#8适配子”,所述SEQ ID No.6可记为“#9适配子”;
所述SEQ ID No.1为:5′-TCA GTC GCT TCG CCG TCT CCT TC
GGGGGCGCGGTGAGGGGCTGCACAAGAGGGAG GCA CAA GAG GGA GAC CCC AGAGGG-3′;
所述SEQ ID No.2为:5′-TCA GTC GCT TCG CCG TCT CCT TCGGACGAGATGGGCGGGAAACGAGGCACAAGAGGGA GCA CAA GAG GGA GAC CCCAGAGGG-3′;
所述SEQ ID No.3为:5′-TCA GTC GCT TCG CCG TCT CCT TCGTAGGAGGTAGTCGGAGAGGCGAATGAGAGGGGAAGCACAAGAGGGA GCA CAA GAGGGA GAC CCC AGA GGG-3′;
所述SEQ ID No.4为:5′-TCA GTC GCT TCG CCG TCT CCT TCAGCCGGGGTGGTCAGTAGGAGCA GCA CAA GAG GGA GAC CCC AGA GGG-3′;
所述SEQ ID No.5为:5′-TCA GTC GCT TCG CCG TCT CCT TCAGCCGGGGTGGTCAGTAGGAGCAGCACAAGAGGGA GCA CAA GAG GGA GAC CCCAGAGGG-3′;
所述SEQ ID No.6为:5′-TCA GTC GCT TCG CCG TCT CCT TCTGCAGGGCCAGAACAGGGGGAAGGCACAAGAGGGA GCA CAA GAG GGA GAC CCCAGAGGG-3′。
2.如权利要求1所述6条寡核苷酸序列的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)合成用于筛选的ssDNA寡核苷酸文库(5′-TCA GTC GCT TCG CCG TCT CCT TC----N35----GCACAAGAG GGAGAC CCCAGAGGG-3′),其中N35为35个随机寡核苷酸;
2)将寡核苷酸文库与灭活溶藻弧菌混合后进行SELEX筛选,直到亲和力不再明显上升为止;
3)SELEX筛选完成后对适配子富集文库进行克隆测序,选择其中的高拷贝ssDNA进行亲和特异性的验证和亲和常数的测定,获得相应适配子。
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