[发明专利]一种抗菌蛋白HAS1编码基因的克隆、表达及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物产生的对植物病原菌存在抑菌活性的新抗菌蛋白，更具体地说，涉及一种来源于微生物的新抗菌蛋白的鉴定和应用。本发明是建立在生防菌株HAS对甘蔗黑穗病菌具有很好抑制作用的基础之上。

背景技术

甘蔗黑穗病是由Ustilago scitaminea Sydow. 引起的一种真菌病害，属担子菌纲黑粉菌属。该病害最早是在1877年南非纳塔尔发现，随后在东半球的亚洲和非洲的大部分国家均有报道。1940年在美洲阿根廷发生，随后西半球也发生该病害。20世纪70-90年代，夏威夷、弗罗里达、摩洛哥、澳大利亚等国家、地区也相继有该病害发生的报道。中国于1932年在广州发现该病害，之后各地也都出现该病。特别是近年来，随着蔗种无性繁殖栽培技术的推广，蔗种频繁引进调运，蔗田长期连作同一品种以及宿根蔗年限的逐渐延长，造成甘蔗黑穗病在我国广西、云南、广东、福建、海南等省蔗区发生日趋严重，造成的损失多达10-30%，严重的宿根蔗几乎绝收。

甘蔗黑穗病危害严重，但对其的防治效果不理想。生物防治因对环境友好和易于使用而在其它作物病害上已部分地发挥作用，但用于甘蔗黑穗病病害的防治一直停滞不前。国内外也有利用微生物对甘蔗黑穗病菌孢子进行作用的报道。国外，Sinha和Singh报道四种真菌（Fusarium moniliforme [Gibberella fujikuroi] var. subglutinans, Aspergillus niger, A.flavus and Penicilliumsp.）对甘蔗黑穗病的黑鞭的产生和对冬孢子萌发的抑制作用。国内，广西大学廖咏梅等采集甘蔗苗期、生长期的甘蔗土壤、健株及病株的种蔗、叶、茎、芽、根和土壤中分离筛选到一些对黑穗病菌有抑制作用的菌株，并利用相关基因序列设计特异性引物，探讨得到相关抑制因子的基因。但未见用生物防治措施有效控制黑穗病的系统报道。迄今为止，尚未见到利用微生物及其生防制剂成功用于防治甘蔗黑穗病的相关报导。

发明内容

本发明目的在于提供一种抗菌蛋白编码基因HAS1基因序列及其在防治甘蔗黑穗病方面的应用。

为实现上述目的，本发明采取如下技术方案：

一种抗菌蛋白编码基因HAS1基因序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO. 1所示，具体如下：

长度：750bp

类型：核酸

链型：双链

形态：线性

分子类型：基因组DNA

序列描述：

ATGGCGAAACCACTATCAAAGGGGGGAATTTTGATGAAAAAAGTATTGATTGCAGGTGCAGTAGGAACAGCAGTTCTTTTCGGAACCCTTTCATCAGGTATACCAGGCTTACCAGCGGCAGACGCTCAAGTCGCAAAAGCAGCATCCCAGCTGCCTAACGGAATCGGCGGCCGTGCCTACCTGAACAGTACGGGCGCCGTTTTTACAGCTAAAATCACGCTTCCTGAAACTGTCAAAAATAACGACTCGGTCTCTACTCCCTATATTTATTCAGGCTTTAGGGCATCAAGCGGAACTGAAGCCGATATCGGGCTTCAGTACAGCAAACAATACAACGTCTGGAAGCCCCTCATGAAGGTTGGGTCCAAAAATGAAGAAACGTACATCGAAGGAAAAGATAAATTCACATACAATAAAGGCTTCCGCCCTGGAAGCACAGTCCAAATGACAATCTATAAAAATTTAAGCGGCAATACGCGCATGACCCTTTGGGGAACGAACAATGACGGCTACACCGGAAGGATTATCACAGAAATTCAAGGAACCAACATCGGCACGATTTCAAAATGGAAAACCCTTGCTACCGCGGCTGTTTCGTATGAAAGCCAGCGTGATGCGATCAAAGCAACCTTTTCGACATCTTTTAACAACATCACAATCGACAATAAAGCCGTCACTCCTGTGGTAGATACACAGGATTTCGCAAAGGTTTCAGTTGCAGGAAATAACGTTACGATCTCTGTTAATAAA。

所述的抗菌蛋白编码基因HAS1基因序列，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，具体如下：

长度：250