[发明专利]一种干细胞培养基及其应用和干细胞培养方法

权利要求书

1.一种干细胞培养基，其特征在于，所述干细胞培养基中不含血清，所述干细胞培养基包括氨基酸、维生素、盐类、脂类、细胞因子和蛋白多肽；

其中，所述氨基酸包括丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸及谷氨酰胺；

所述细胞因子和蛋白多肽包括成纤维细胞生长因子1、成纤维细胞生长因子2、表皮生长因子、血小板衍生生长因子、胰岛素、胰岛素样生长因子1、血管内皮细胞生长因子、胎盘生长因子、白血病抑制因子、 干细胞因子、转铁蛋白和人血清白蛋白；

所述维生素包括生物素、氯化胆碱、D-泛酸钙、叶酸、肌醇、烟酰胺、吡哆醇盐酸盐、核黄素、盐酸硫氨、辅酶Q10、维生素B12、腐胺二盐酸盐、维生素C和维生素E；

所述脂类包括地塞米松、油酸、胆固醇、乙醇胺、亚油酸、硫辛酸和脂质混合物；

所述盐类包括碳酸氢钠、氯化钙、氯化钾、氯化镁、硫酸镁、氯化钠、一水磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和丙酮酸钠；

所述干细胞培养基还包括抗氧化剂、D-葡萄糖、牛磺酸、肝素钠。

2.根据权利要求1所述的干细胞培养基，其特征在于，所述干细胞培养基以1升计算，包括以下组分：

丙氨酸       0.01~0.25mM

精氨酸       0.4~10 mM

天冬酰胺     0.11~2.75 mM

天冬氨酸     0.03~0.75 mM

半胱氨酸     0.03~0.75 mM

谷氨酸       0.03~0.75 mM

甘氨酸       0.05~1.25 mM

组氨酸       0.03~0.75 mM

异亮氨酸     0.5~12.5 mM

亮氨酸       0.24~6 mM

赖氨酸       0.2~5 mM

甲硫氨酸     0.12~3 mM

苯丙氨酸     0.21~5.25 mM

脯氨酸       0.004~0.1 mM

丝氨酸       0.15~3.5 mM

苏氨酸       0.06~1.5 mM

色氨酸       0.02~0.5 mM

酪氨酸       0.03~0.75 mM

缬氨酸       0.28~7 mM

谷氨酰胺     0.8~20 mM

表皮生长因子            1-10 mg/L

纤维细胞生长因子1       1-10 mg/L

纤维细胞生长因子2       1-10 mg/L

胰岛素样生长因子1       1-10 mg/L

白细胞因子               1-10 mg/L

血小板衍生生长因子       1-10 mg/L

胎盘生长因子             1-10 mg/L

干细胞因子               1-10 mg/L

血管内皮细胞生长因子     1-10 mg/L

胰岛素           1~25 mg/L

转铁蛋白         4~100 mg/L

人血清白蛋白     0.02~0.5 g/L

生物素            6~150mM

氯化胆碱         12~300mM

叶酸             1.2~30mM

辅酶Q10         0.2~5mM

地塞米松         2~50 nM

D-泛酸钠         1~25mM

肌醇             14~350mM

烟酰胺           4~100mM

吡哆醇盐酸盐     0.03~0.75mM

核黄素           0.11~2.75mM

盐酸硫氨         0.11~2.75mM

维生素B12       0.1~2.5mM

腐胺二盐酸盐     0.1~2.5mM

维生素C         2~50 mg/L

维生素E         0.05~1.25 mg/L

肝素钠           0.08~2 g/L

D-葡萄糖         3.6~90 mM

还原性谷胱甘肽   0.0002~0.005 mg/L

牛磺酸        0.00144~0.36 g/L

β-巯基乙醇    0.01~0.25mg/L

酚红          1.62~40.5 mg/L

油酸          0.5~12.5 mg/L

亚油酸        0.5~7.5 mg/L

硫辛酸        0.02~0.5 mg/L

脂质混合物    0.2~5 ml/L

胆固醇        1~25 mg/L

乙醇胺        12~300ml/L

碳酸氢钠      2.32~58 mM

氯化钙        0.0168~0.42 mM

氯化钾        0.832~20.8 mM

氯化镁        0.06~1.5 mM

硫酸镁        0.0814~2.035 mM

氯化钠        24.122~603.55 mM

一水磷酸二氢钠     0.0906~2.265 mM

磷酸氢二钠      0.1~2.5 mM

丙酮酸钠        0.1~2.5 mM 。