[发明专利]一种生牛乳体细胞检测比色杯及其制作方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品检测技术领域，具体地，本发明涉及一种生牛乳体细胞检测比色杯及其制作方法。

背景技术

生牛乳中的体细胞数是指每毫升生牛乳中的细胞总数，体细胞数是衡量生牛乳品质与供应生牛乳动物乳腺健康的重要指标，需要简便、成本低、准确度高的检测方法。

目前国内外乳品行业应用的生牛乳体细胞数或乳房炎的检测方法很多，通用的方法包括仲裁法-显微镜直接观察法、电子计数仪检测法、加利福尼亚细胞数测定法(CMT)、酯酶法。其中，仲裁法-显微镜直接观察法需要染色、制片、观察、计数，十分繁琐，易造成操作人员视觉疲劳出现人为误差，且其所用的试剂(四氯乙烷)具有强毒性。电子计数仪检测法设备价格昂贵、运行成本高；加利福尼亚细胞数测定法只是对生牛乳的凝固状态进行粗略的判断，主观性强，结果不够准确。

酯酶法是基于粒细胞胞质内含有特异性酯酶可作用于底物芳香酯，释放出酚，酚又与重氮盐发生反应形成紫色络合物，颜色深浅与体细胞数呈一定的比例关系。但酯酶法未能广泛应用于生牛乳验收，以及奶牛乳房炎判定，主要原因为：芳香酯检测生牛乳时用量微小，需精密称量；重氮盐配制方法繁琐，分布广泛的生牛乳检测现场无法具备精密称取药品、配制反应溶液的条件。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种生牛乳体细胞检测比色杯，该比色杯能够快速、敏感、便捷的对生牛乳中的体细胞进行检测。

为达到上述目的，本发明采用了如下的技术方案：

一种生牛乳体细胞检测比色杯，所述比色杯底部设置检测块，所述检测块包括芯材和壁材；

所述芯材的组成成分包括1～12份芳香酯、1～18份重氮盐、0.1～1.6份增溶增敏剂，200份水溶解上述成分，浓度为0.1mol/L缓冲溶液调溶液的pH为8.0；

所述壁材的组成成分包括酪蛋白5～10份、大豆蛋白或乳清蛋白15～30份、乳糖或蔗糖20～50份。

所述芳香酯为吡咯酯，也可以是其他芳香酯，比如吲哚酯等。

所述重氮盐为1-氨基-2-萘酚-4-磺酸重氮盐，也可以是其他的重氮盐，如氟硼酸重氮盐。

所述缓冲溶液为Tris-盐酸缓冲溶液。

所述增溶增敏剂为EDTA。

本发明采用微胶囊技术，以芳香酯及重氮盐为芯材，并根据芯材性质以及检测样品（生牛乳）性质配制壁材，使壁材即可有效承载并保护芯材，又可以在与生牛乳接触时迅速崩解，快速反应。

本发明通过真空干燥技术使用壁材包埋吡咯酯及重氮盐，在比色杯底部形成质地细致均匀的药品固体方块，且比色杯底部采用避光处理，-10℃～10℃条件保存。

本发明的壁材中，乳糖或蔗糖为惰性载体，可有效保护芯材自身不发生反应变色。其中，乳糖与大豆蛋白颗粒小、易溶解，与待测样品溶液混合后可迅速崩解释放芯材。乳糖和大豆蛋白联合使用不会造成吡咯酯及重氮盐在运输或使用过程中的损失，且可赋予成品细腻丰满的质感。酪蛋白在壁材配制中具有乳化作用，同时具有pH调节作用，使溶液以及成品的pH更接近中性。

一般生牛乳的pH为6.3～6.8，因此，本发明试剂反应的最佳pH条件为弱碱环境，故在配制过程中需要添加缓冲溶液，调节pH。

本发明的使用方法：量取1～2mL生牛乳注入比色杯，震荡、混匀，静置1～10min观察生牛乳颜色变化。

本发明的另一个目的在于，提供一种生牛乳体细胞检测比色杯的制备方法，所述方法包括以下步骤：

1）比色杯处理：比色杯经超声波处理10～30分钟，水冲洗，热风干燥箱干燥；

2）芯材溶液：1～12份芳香酯、1～18份重氮盐、0.1～1.6份增溶增敏剂，200份水溶解上述原料，浓度为0.1mol/L缓冲溶液调溶液的pH为8.0；

3）壁材溶液：酪蛋白5～10份、大豆蛋白或乳清蛋白15～30份、乳糖蔗糖20～50份，100ml水溶解上述原料得到壁材溶液；

4）混合溶液注入比色杯：芯材溶液：壁材溶液按照1：1混合，取混合溶液0.15～0.25mL注入比色杯，膜封口，膜上扎孔；

5）真空冷冻干燥：-80～-20℃预冻2～8h，1～20pa真空干燥5～10h；

6）避光处理：真空冷冻干燥后，比色杯底部形成检测块，采用不透光材质包裹比色杯底部或采用不透光涂料涂布比色杯底部，得到生牛乳体细胞检测比色杯。

所述混合溶液0.15～0.25mL注入比色杯中，优选混合溶液0.2mL注入比色杯中。