[发明专利]一种生牛乳体细胞检测试纸及其制备方法

权利要求书

1.一种生牛乳体细胞检测试纸的制备方法，其包括以下步骤：

第一次浸泡：将滤纸在表面活性剂溶液中浸泡1-10min，然后在缓冲液中浸泡1-10min；

第一次烘干；

第二次浸泡：将第一次烘干后的滤纸在第二次浸泡液中浸泡1-5min；

第二次烘干，得到所述生牛乳体细胞检测试纸。

2.如权利要求1所述的制备方法，其中，所述表面活性剂溶液包括Tween-20溶液、Tween-80溶液、Triton X-100溶液和EDTA溶液中的一种或几种的组合；优选地，所述表面活性剂溶液为EDTA溶液；更优选地，所述EDTA溶液的浓度为0.05-0.2重量％。

3.如权利要求2所述的制备方法，其中，所述缓冲液包括Tris-盐酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼砂-盐酸缓冲液和巴比妥钠-盐酸缓冲液中的一种或几种的组合；优选地，所述缓冲液为Tris-盐酸缓冲液；更优选地，所述Tris-盐酸缓冲液的浓度为0.05-0.2mo1/L。

4.如权利要求1-3任一项所述的制备方法，其中，所述第二次浸泡液是通过以下步骤制备的：

将1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶于水并搅拌为糊状，形成1-氨基-2-萘酚-4-磺酸糊状液，然后冷却至2-7℃，向所述1-氨基-2-萘酚-4-磺酸糊状液中加入CuSO₄饱和溶液，形成1-氨基-2-萘酚-4-磺酸混合溶液；

将亚硝酸钠溶于水中，形成亚硝酸钠溶液；

以亚硝酸钠溶液∶1-氨基-2-萘酚-4-磺酸混合溶液＝1∶4-1∶11的质量比，在3-5℃搅拌条件下，将所述亚硝酸钠溶液滴加到所述1-氨基-2-萘酚-4-磺酸混合溶液中，5-10min后滴加完毕，之后在3-5℃搅拌20-60min，形成第二次浸泡液的粗产物，经过滤后，得到所述第二次浸泡液。

5.如权利要求4所述的制备方法，其中，以重量比计，所述1-氨基-2-萘酚-4-磺酸∶水＝1-3∶6-18。

6.如权利要求4或5所述的制备方法，其中，以所述1-氨基-2-萘酚-4-磺酸糊状液的总重量计，所述CuSO₄饱和溶液的添加量为1％-3％。

7.如权利要求4-6任一项所述的制备方法，其中，以重量比计，所述亚硝酸钠∶水＝3-10∶6-18。

8.如权利要求1-7任一项所述的制备方法，其中，所述制备方法还包括以下步骤：将滤纸在硫酸铜干燥皿中放置20-40min进行预处理。

9.如权利要求1-8任一项所述的制备方法，其中，所述第一次烘干在50-90℃下进行；所述第二次烘干在50-70℃下进行。

10.一种生牛乳体细胞检测试纸，其是由权利要求1-9任一项所述的生牛乳体细胞检测试纸的制备方法所制备得到的。