[发明专利]一种抗三唑磷和毒死蜱的双特异性单克隆抗体及其制备方法和应用无效
申请号: | 201210569197.1 | 申请日: | 2012-12-25 |
公开(公告)号: | CN103044553A | 公开(公告)日: | 2013-04-17 |
发明(设计)人: | 金仁耀;朱国念;桂文君 | 申请(专利权)人: | 浙江工商大学 |
主分类号: | C07K16/44 | 分类号: | C07K16/44;G01N33/577 |
代理公司: | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人: | 吴秉中 |
地址: | 310018 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 抗三唑磷 毒死 特异性 单克隆抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种抗三唑磷和毒死蜱的双特异性单克隆抗体,其特征在于所述的单克隆抗体对三唑磷和毒死蜱同时具有特异性。
2.一种抗三唑磷和毒死蜱的双特异性单克隆抗体的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)合成三唑磷和毒死蜱的半抗原和人工抗原;
2)利用三唑磷人工抗原制备分泌抗三唑磷的杂交瘤细胞株;
3)利用毒死蜱人工抗原制备分泌抗毒死蜱的杂交瘤细胞株;
4)抗三唑磷的杂交瘤细胞株和抗毒死蜱的杂交瘤细胞株进行细胞融合后筛选得到四体杂交瘤细胞,所述的四体杂交瘤细胞分泌抗三唑磷和毒死蜱的双特异性单克隆抗体。
3.如权利要求2所述的一种抗三唑磷和毒死蜱的双特异性单克隆抗体的制备方法,其特征在于所述的步骤2)中分泌抗三唑磷的杂交瘤细胞株通过以下方法制备得到:以4-[O-乙基-O-[3-(1-苯基-1,2,4-三唑基)]硫代磷酰胺基]-丁酸为半抗原,合成人工抗原后免疫小鼠,再取脾细胞与SP2/0细胞进行融合、筛选,然后经过含8-杂氮鸟嘌呤或5-溴-2-脱氧尿苷筛选,使其HGPRT酶或者TK酶缺陷后得到分泌抗三唑磷的杂交瘤细胞株。
4.如权利要求2所述的一种抗三唑磷和毒死蜱的双特异性单克隆抗体的制备方法,其特征在于所述的步骤3)中分泌抗毒死蜱的杂交瘤细胞株通过以下方法制备得到:以4-[O-乙基-O-(3,5,6-三氯-2-吡啶基)硫代磷酰胺基]-丁酸为毒死蜱半抗原,合成人工抗原后免疫小鼠,再取脾细胞与SP2/0细胞进行融合、筛选,然后经过含5-溴-2-脱氧尿苷或8-杂氮鸟嘌呤筛选,使其HGPRT酶或者TK酶缺陷后得到分泌抗毒死蜱的杂交瘤细胞株。
5.一种抗三唑磷和毒死蜱的双特异性单克隆抗体在检测三唑磷和毒死蜱中的应用。
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