[发明专利]一种从堆肥中快速、高效筛选拮抗细菌的方法无效
| 申请号： | 201210571335.X | 申请日： | 2012-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN103013884A | 公开（公告）日： | 2013-04-03 |
| 发明（设计）人： | 李萍萍;林英;司春灿;杜道林;赵青松;朱咏莉 | 申请（专利权）人： | 江苏大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/07;C12R1/22 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 汪旭东 |
| 地址： | 212013 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 堆肥 快速 高效 筛选 拮抗 细菌 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种从堆肥中快速、高效筛选拮抗细菌的方法，其特征在于按照以下几个步骤进行：
（1）拮抗菌的初筛：将堆肥悬浮液涂布于马铃薯葡萄糖琼脂培养基上后再直接涂布致病菌孢子悬浮液，使细菌与致病菌直接对峙；
（2）目标细菌的纯化：待平板上形成抑菌圈后，从抑菌圈内将混合的目标细菌进行划线，纯化；
（3）拮抗细菌的复筛：采用平板对峙法将纯化的目标细菌的菌液分别点接到含有病原菌的平板上，通过观察抑菌圈的有无，筛选出拮抗菌。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于制备重量百分比为10%堆肥原液后，依次制备稀释度为10-1，10-2，10-3，10-4，10-5，10-6的堆肥悬浮液，堆肥悬浮液涂布的量为100μl，致病菌孢子悬浮液涂布的量为200 μl，浓度为l×106CFU/ ml。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（2）纯化直至每个培养皿中细菌菌落的形状、大小和颜色相同。
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