[发明专利]一种实现基因组定点修饰的蛋白表达载体的方法有效

专利信息
申请号: 201210572536.1 申请日: 2012-12-25
公开(公告)号: CN103898099B 公开(公告)日: 2017-08-25
发明(设计)人: 袁晶;王惠 申请(专利权)人: 袁晶;王惠
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12N15/63;C12N15/10;C12N15/64
代理公司: 北京市柳沈律师事务所11105 代理人: 钟鸣
地址: 100085 北京市*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 实现 基因组 定点 修饰 蛋白 表达 载体 方法
【权利要求书】:

1.一种试剂盒,包括下述180个DNA序列:

(1)144个包含“双碱基重复单元表达元件”的DNA序列,所述“双碱基重复单元表达元件”的序列如SEQ ID NO:11~154所示;

(2)32个包含“单碱基重复单元表达元件”的DNA序列,所述“单碱基重复单元表达元件”的序列如SEQ ID NO:155~186所示;以及

(3)4个包含“末位单碱基重复单元表达元件”的DNA序列,所述“末位单碱基重复单元表达元件”的序列如SEQ ID NO:187~190所示。

2.权利要求1的试剂盒,所述试剂盒还包括

(4)已构建的哺乳动物真核表达载体,其为pCMV-TALEN。

3.权利要求1的试剂盒,包括下述180个环状质粒:

(1)144个“双碱基重复单元表达元件质粒”,每个质粒由一个“双碱基重复单元表达元件”和该元件两翼的5’和3’侧翼质粒骨架序列组成,命名为pXX-n,XX为A、C、T、G的所有16种两两组合,n为1-9,其中所述双碱基重复单元表达元件”的序列如SEQ ID NO:11~154所示;

(2)32个“单碱基重复单元表达元件质粒”,每个质粒由一个“单碱基重复单元表达元件”和该元件两翼的5’和3’侧翼质粒骨架序列组成,命名为pX-n,X为A、T、C或G,n为2-9,其中所述“单碱基重复单元表达元件”的序列如SEQ ID NO:155~186所示;以及

(3)4个“末位单碱基重复单元表达元件质粒”,每个质粒由一个“末位单碱基重复单元表达元件”和该元件两翼的5’和3’侧翼质粒骨架序列组成,分别是pC-L、pG-L、pA-L和pT-L,其中所述“末位单碱基重复单元表达元件”的序列如SEQ ID NO:187~190所示;

其中,所述5’和3’侧翼质粒骨架序列分别为SEQ ID NO:9和10。

4.权利要求3的试剂盒,所述试剂盒还包括

(4)已构建的哺乳动物真核表达载体,其为pCMV-TALEN。

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