[发明专利]糖化血红蛋白质控品的制备方法

权利要求书

1.一种糖化血红蛋白质控品的制备方法，其特征在于：它包括以下制备步骤：

1）先在反应液中加入血红蛋白，使每分升反应液中血红蛋白含量为1-40克，在15-45℃下糖基化反应1-10天后，离心除去沉淀，留取上清夜，其中所述反应液成分为：

缓冲液：20-200mM，pH 7.0-7.5

氯化钠：9g/L

葡萄糖：50-200mM

还原剂：20-200mM

金属螯合剂：0.1-10mM

防腐剂质量百分含量：0.1-5%

其中上述溶剂为水；

2）将步骤1）中制备的上清液装入透析袋，置于4℃透析液中透析至完全除去葡萄糖，离心取上清液，其中所述透析液成分为：

缓冲液：20-200mM，pH 7.0-7.5

氯化钠：9g/L

还原剂：20-200mM

金属螯合剂：0.1-10mM

防腐剂质量百分含量：0.1-5%

其中上述溶剂为水；

3）将步骤2）中制备的上清液用血红蛋白稀释液稀释至所需质控品浓度，加入赋形剂，然后进行低温预冻、冷冻干燥，制成冻干粉，最后将冻干粉复溶、分装即可使用。

2.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白质控品的制备方法，其特征在于：所述血红蛋白为重组人血红蛋白。

3.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白质控品的制备方法，其特征在于：所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液、乙酸-乙酸钠缓冲液、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液、甘氨酸-盐酸缓冲液、Good’s缓冲液中的一种。

4.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白质控品的制备方法，其特征在于：所述还原剂为磷酸三（β-氯乙基)酯（TCEP）、二硫苏糖醇（DTT）、β-巯基乙醇、还原型谷胱甘肽、L-半胱氨酸、维生素C中的一种。

5.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白质控品的制备方法，其特征在于：所述金属螯合剂为乙二胺四乙酸（EDTA）、乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸（EGTA）中的一种。

6.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白质控品的制备方法，其特征在于：所述防腐剂为苯甲酸钠、叠氮钠、山梨酸钾、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、proclin300中的一种。

7.根据权利要求1所述的糖化血红蛋白质控品的制备方法，其特征在于：所述赋形剂由冻干保护剂，填充剂，抗氧化剂，酸碱调整剂组成，其中各组分以它们加入溶液后的含量计为：冻干保护剂质量百分含量0.5-10%，填充剂质量百分含量0.5-15%，抗氧化剂摩尔浓度0.1-20mM，酸碱调整剂摩尔浓度0.05-20mM。

8.根据权利要求7所述的糖化血红蛋白质控品的制备方法，其特征在于：所述冻干保护剂为甘油、二甲基亚砜（DMSO）、海藻糖、蔗糖、右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）中的一种；所述填充剂为甘露醇、山梨醇、PEG4000、明胶中的一种；所述抗氧化剂为维生素D、维生素E、硫代硫酸钠中的一种；所述酸碱调整剂为乙二胺四乙酸二钠（EDTA）、甘氨酸、谷氨酸钠中的一种。