[发明专利]一种用于修复石油污染的盐碱土壤的微生物菌剂及制备

权利要求书

1.一种用于修复石油污染的盐碱土壤的微生物菌剂，其特征在于：由无机盐原油培养基和将有石油污染的自然盐碱土壤样品接种于该无机盐原油培养基中提取的细菌菌群组成，其中无机盐原油培养基由基础无机盐溶液和原油组成，细菌菌群中的石油专性降解菌为鞘脂杆菌属、丛毛单胞菌属、噬几丁质菌属、芽孢杆菌属。

2.根据权利要求1所述用于修复石油污染的盐碱土壤的微生物菌剂，其特征在于：所述基础无机盐溶液的组成为：1g NaCl、0.1g(NH₄)₂SO₄、0.025gMgSO₄·7H₂O、0.2g NaNO₃、0.4g KH₂PO₄、1.0g K₂HPO₄·3H₂O和100mL蒸馏水，无机盐石油培养基为上述100mL基础无机盐溶液与2g原油混合、pH为7.0的混合液。

3.一种如权利要求1所述用于修复石油污染的盐碱土壤的微生物菌剂的制备，其特征在于步骤如下：

1）细菌菌群的提取

将10g有石油污染的自然盐碱土壤样品接种于100mL无机盐原油培养基中，置于恒温水浴摇床，在140rpm、30℃条件下，连续培养7天，即可以将样品中的细菌菌群提取出来，该细菌菌群对盐分和石油具有一定的耐受力，将其制成微生物菌液；

2）细菌菌群的富集培养

将上述微生物菌液重新接种在新制备的原油培养基中，连续富集3-4个周期，富集培养条件为温度30℃、140rpm/min恒温水浴摇床，使微生物总量达到10¹⁰-10¹²cfu/mL并稳定，制得微生物菌剂；

3）微生物菌剂保存和使用

微生物菌剂采用两种方式保存：一是冷冻保存，即将制备好的微生物存放在-18℃冰箱中保存，保存时间不超过150天，使用时快速放入30℃恒温水浴摇床中急剧解冻，然后放入新制备的无机盐石油培养基中培养；二是低温保存，即将制备好的液体制剂存放在4℃冰箱中保存，保存时间不超过45天，使用时可直接放入新制备的无机盐石油培养基中并在30℃恒温水浴摇床中培养。