[发明专利]异虎耳草素作为制备抗肿瘤药物以及抗癌逆转剂方面的应用

说明书

技术领域：本发明涉及从蛇床子中分离得到的高纯度天然化合物异虎耳草素及其用于肿瘤防治和肿瘤辅助治疗用药方面的应用。 

背景技术：恶性肿瘤是目前危害人类健康导致死亡最为严重的疾病之一。流行病学调查表明我国不仅肿瘤死亡率呈明显上升趋势，而且兼有发展中国家和发达国家高发谱并存的特点。20世纪90年代我国肿瘤发病率已上升为127例/10万人。近年来我国每年新增肿瘤患者160万～170万人，总数估计在450万人左右。为此，世界各国都投入大量的人力和财力对肿瘤的防治进行研究。目前，肿瘤的治疗一般采用手术切除、放射治疗、化学药物治疗以及上述方法结合应用等治疗方法。放化疗在临床使用上由于其较大的副作用而收效甚微，而手术切除又难以防止其复发，为了防止其复发，手术后仍然要使用化疗药物进一步治疗。最近，研究发现很大程度上化疗药物在治疗肿瘤方面疗效发挥不佳的主要原因，与肿瘤细胞多药耐药性基因编码的存在于细胞膜上的一种固有蛋白——P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)有关。单克隆抗体免疫定位研究表明，P-gp分布于多数肿瘤细胞与正常组织细胞中，特别是胃、肠道下段的柱状上皮细胞、脑与睾丸毛细血管内皮细胞、肝细胞的胆管侧膜与肾近曲小管刷状缘，其在不同个体之间的表达差异由MDR/mdr基因型决定。这些细胞大多位于药物吸收、分布、代谢与排泄的关键部位，对药物的体内过程起重要作用。P-gp选择性分布于体内药物的“入口”与“出口”等关键部位，对药物吸收、分布、代谢与排泄等体内过程具有重要意义。在肿瘤细胞和组成血脑屏障(blood-brain barrier，BBB)的脑毛细血管内皮细胞(braincapillary endothelial cells，BCEC)上均有高度表达。它以一种ATP依赖性的方式将多种化疗药物以及其它疏水性化合物经主动转运排出细胞外，阻止许多治疗药进入肿瘤细胞和脑内，是肿瘤产生MDR以及许多药物难以透过BBB的主要原因之一。如果能够寻找和开发抑制P-gp功能的P-gp逆转剂，将治疗药物与P-gp逆转剂合用能增加治疗药在靶组织的药物浓度，这将有助于更好地治疗恶性肿瘤和中枢神经系统(CNS)疾病。 

从中药蛇床子中分离得到的天然化合物异虎耳草素，一方面具有抗肿瘤作用，另一方面又具有抑制P-糖蛋白(P-gp)的作用，从而可以作为抗癌逆转剂开发应用，即和化疗药物联合使用既能够增强抗肿瘤的作用，又能够减少化疗药物的毒副作用，这一发现和应用尚未见报道。 

发明内容

本发明的目的在于公开了从中药蛇床子中分离得到的高纯度天然化合物异虎耳草素作为 制备肿瘤治疗药物和肿瘤辅助治疗药物中的应用，它一方面具有抗肿瘤作用，一方面又具有抑制P-糖蛋白(P-gp)的作用，可以作为P-gp逆转剂和化疗药物联合用药，既能够增强抗肿瘤的作用，又能够减少化疗药物的毒副作用的特点。 

本发明涉及的高纯度天然化合物异虎耳草素是从伞形科蛇床属植物蛇床(Cnidiummonnieri(L.)cusson)的果实中分离得到的单体化合物，其结构为： 

分子式：C₁₃H₁₀O₅

我们对天然单体化合物异虎耳草素进行加速实验考察(高温、高湿、强光照射)，结果发现其对高温、高湿、强光照射稳定，无分解，纯度及理化指标不变。技术指标达到一类新药报批的要求。结果见表1。 

表1异虎耳草素加速稳定性实验考察 

异虎耳草素经UV、IR、MS、¹H-NMR、¹³C-NMR、熔点测定、TLC及性状分析与文献报道相一致。 

异虎耳草素具有如下性质：在显微镜下其为草绿色针状结晶，在紫外灯下显棕黄色荧光。 

熔点Mp：149-151℃； 

TLC比移值Rf为：0.456(石油醚∶乙酸乙酯8∶2) 

光谱分析 

UVλ^EtOHmax(nm)：241，248，270，313 

IR v^KBrmax(cm^-1)：3125-3050(CH)，1720(＞C＝O)，1582，1470(苯环)。