[发明专利]一种蒙花苷单体的分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从植物中分离化合物单体的方法，具体来说，涉及一种从野菊花中提取蒙花苷单体的分离纯化方法，属于化合物单体的分离纯化技术领域。

背景技术

野菊花（Flower of Indian Dendranthema,Wild chrysanthemum）为菊科多年生草本植物野菊的头状花序，外形与菊花相似。产品以色黄无梗、完整、气香、花未全开者为佳。野菊花可广泛用于治疗疔疮痈肿、咽喉肿痛、风火赤眼、头痛眩晕等病证。同时又有很好的降压作用，可用于高血压病的辅助治疗。

蒙花苷是野菊花的特征性化学成分，也是野菊花中活性最高的黄酮类成分，其英文名为Buddleoside，化学名为: 7-[[6-O-(6-deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)-beta-D-glucopyranosyl]oxy]-5-hydroxy-4'-methoxyflavone，分子式为C₂₈H₃₂O₁₄，分子量为592.54，属于Flavonoids黄酮类，其结构式如下:

基于蒙花苷是野菊花的特征性化学成分，因此，如果能以蒙花苷作为该药材及其相关制剂的质量评价指标，既能较真实地反映其质量又具有专属性，可对野菊花药材及其制剂的质量控制起到重要作用。

但是，发明人通过检索大量文献发现，目前只有关于野菊花中蒙花苷结晶纯化的报道，且蒙花苷未达到标准品所需要的纯度，而对于蒙花苷单体液相色谱分离工艺却未见有相关报道。

中国专利CN200910057065.9提供一种从野菊花中制备蒙花苷提取物的方法，获得的提取物中蒙花苷含量在50%以上。具体的技术方案为：将野菊花加入乙醇水溶剂，采用热回流或者渗漉提取，将提取溶液浓缩至无醇味，后将浓缩液pH值调节至10，放置，取上清液用酸调节pH至7-8左右，过滤沉淀后，取上清液上大孔树脂，先用水洗脱，然后用10%-30%的乙醇水和50%-80%的乙醇水洗脱，收集50%-80%的馏分。将50%-80%的馏分浓缩，干燥，得蒙花苷提取物，蒙花苷含量在50%以上。由该方法提取得到的蒙花苷的含量只能达到50%以上，无法得到高纯度的蒙花苷单体，对药材的研究与质量控制意义不大。

另外，中国专利CN201110195580.0 公开了一种从野菊花中提取蒙花苷的方法，包括如下步骤：(1)原料预处理：将干燥的野菊花除杂、切碎，使用去离子水常温浸泡5~10h，甩干水液后，备用；(2)碱水提取：加入重量为野菊花原料干重6~10倍的质量浓度为2‰~8‰的碱水溶液，在70℃~80℃的条件下，浸泡提取≥2次，每次浸泡2~3h，过滤，得提取液；(3)醇沉：将步骤(2)所得提取液蒸发浓缩至原提取液重的1/20~1/15，然后加入重量为所得浓缩液2~3倍的95%(体积)乙醇，在20℃~30℃下静置6~10h，过滤，得醇液；(4)萃取：将步骤(3)所得醇液蒸发浓缩至原所得醇液量重的1/6~1/5，然后加入重量为所得浓缩液2~3倍的石油醚萃取≥2次，收集下层重液，上层轻液石油醚层回收；(5)调酸：将步骤(4)所得重液蒸发浓缩至其重量的1/3~1/2后，向其中加入0.2~0.4 mol/L的酸溶液，调节pH至3~5后，冷却至10℃~20℃，静置10~20h，收集沉淀物；(6)大孔树脂吸附分离：将步骤(5)所得沉淀物用相当于沉淀物重量8~12倍体积浓度为60%~80%的乙醇溶解，上大孔吸附树脂柱，流速为1.5~2.0倍柱体积/h，静置2~3h，使用2~3倍柱体积去离子水进行洗脱后，再使用8~12倍柱体积的组合有机溶剂进行洗脱，收集有机溶剂洗脱液；(7)结晶与重结晶：将步骤(6)所得有机溶剂洗脱液蒸发浓缩、干燥后，使用重量为所得干物质10~15倍的组合有机溶剂溶解，并加温至40℃~60℃，保持此温度20~30min后，降温至5℃~10℃，静置10~15h，收集晶体，重结晶3~4次，干燥得成品。所得的野菊花提取物产品，经高效液相色谱法检测，其蒙花苷含量可达95%以上。该方法的工艺较繁琐，且结晶的产品收率较低，含量仍达不到所需药材控制的纯度检测标准。 

发明内容

本发明旨在解决蒙花苷单体无法从结晶中获得高纯度蒙花苷的技术难题，提供一种蒙花苷单体的分离纯化方法。该方法操作简便，生产周期短，分离效率高，工艺稳定，成本易控制，可实现大量蒙花苷单体的高纯度分离制备，得到的蒙花苷单体纯度高，可作为含量测定的对照品使用。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种蒙花苷单体的分离纯化方法，包括如下工艺步骤：