[发明专利]以产甘油假丝酵母特征5.8S序列为整合位点的pURGAP载体构建及其应用

权利要求书

1.一种重组表达载体pURGAP，其特征在，所述载体pURGAP为一种能利用同源重组表达外源基因的产甘油假丝酵母整合载体，所述载体pURGAP的出发载体为pUC18，所述载体pURGAP包含rDNA、渗透压启动子P_CgGAP、zeocin抗性标记，所述rDNA的序列如SEQ NO 1所示，所述载体结构如附图1所示。

2.如权利要求1所述的重组表达载体pURGAP，其以特征5.8S rDNA序列SEQ NO 1为整合位点，扩增5.8S rDNA序列所用的引物rdna1、rdna2为：

rdna1：ACGGAGCTCGAAACTCCGT CGTGC；

rdna2：ACGAAGCTTTGCTTAAGTTCAGCGG；

以特征5.8S rDNA序列SEQ NO 2作为同源整合臂，可提高整合载体的转化效率和表达强度。

3.如权利要求1所述的重组表达载体pURGAP，其特征在于，所述载体pURGAP包含有渗透压启动子P_CgGAP、zeocin抗性标记和在大肠杆菌高拷贝的所有元件。

4.权利要求1所述重组表达载体pURGAP应用于产甘油假丝酵母的渗透压调控外源基因表达、功能基因的稳定表达或过表达功能基因的筛选及鉴定。

5.权利要求1所述重组表达载体pURGAP应用于产甘油假丝酵母高代谢工程改造。