[发明专利]一种烟曲霉蛋白单克隆抗体及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种烟曲霉蛋白单克隆抗体，该单克隆抗体是由保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.6606的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其抗原结合片段保持该单克隆抗体的结合特征。

3.分泌权利要求1所述单克隆抗体的杂交瘤细胞Anti-TR1，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.6606，保藏日期为2012年9月24日。

4.权利要求1所述的单克隆抗体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

a、克隆烟曲霉的一种蛋白的基因；

b、将克隆的烟曲霉蛋白的基因插入表达载体，构建成重组表达载体；

c、将构建的重组表达载体转化感受态大肠杆菌，经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导获得该烟曲霉蛋白高效表达产物，再经亲和层析，得到纯化的该烟曲霉蛋白的重组蛋白；

d、用纯化的该重组蛋白接种小鼠，取其脾淋巴细胞与小鼠Sp2/0骨髓瘤细胞融合，建立杂交瘤细胞系；

e、从上述杂交瘤细胞系中筛选分泌该烟曲霉蛋白抗体的杂交瘤细胞株，选出最稳定、抗体活性最高的细胞株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.6606，该杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体即为权利要求1所述的单克隆抗体。

5.根据权利要求4所述的单克隆抗体的制备方法，其特征在于所述烟曲霉蛋白的基因是用逆转录PCR法从烟曲霉mRNA中扩增出烟曲霉硫氧还蛋白还原酶的cDNA。

6.根据权利要求4所述的单克隆抗体的制备方法，其特征在于所述表达载体优选pET-28a（+）。

7.一种用于诊断曲霉病的试剂组合物，其特征在于所述的试剂组合物含有作为活性成分的有效量的权利要求1所述的单克隆抗体。

8.权利要求1所述的单克隆抗体在制备曲霉病诊断试剂中的应用。

9.权利要求3所述的杂交瘤细胞系在制备曲霉病诊断试剂中的应用。