[发明专利]帕尼单抗、西妥昔单抗靶向用药基因的检测方法及其引物无效
申请号: | 201210579146.7 | 申请日: | 2012-12-27 |
公开(公告)号: | CN103898198A | 公开(公告)日: | 2014-07-02 |
发明(设计)人: | 谢毅 | 申请(专利权)人: | 东龙脉(上海)健康管理服务有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
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地址: | 200335 上海市长*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 帕尼单抗 西妥昔单抗 靶向 用药 基因 检测 方法 及其 引物 | ||
1.一种检测帕尼单抗、西妥昔单抗靶向用药基因突变的方法,其特征在于,具体步骤为:
利用生物信息学知识和相关生物信息学软件,对公开数据库中所能检索到的KRAS和BRAF两种基因序列的突变位点,用Primer Premier 5.0软件设计PCR引物;
采用多重PCR的方法对待检测样本进行PCR扩增;
将PCR扩增产物进行扩增子文库的构建,ISP(Ion SphereTM Particles,Ion微球)模板的制备,在Ion Torrent PGM系统上进行测序,并用软件对相关测序序列进行分析。
2.如权利要求1所述的检测帕尼单抗、西妥昔单抗靶向用药基因突变的方法,其特征在于,所述的PCR引物包括针对两种基因序列的突变位点的引物,其序列分别为:SEQ ID No:1-SEQID No:4:
5’-gtcatcaagtataaacttgtggtagttggagc-3’ SEQ ID No:1;
5’-tctattgttggatcatattcgt-3’ SEQ ID No:2;
5’-gtcatcaagtacagtaataataggtgattttggtcc-3’SEQ ID No:3;
5’-gacgactgttcaaactgatggg-3’ SEQ ID No:4。
3.用于如权利要求1-2所述检测帕尼单抗、西妥昔单抗靶向用药基因突变的PCR引物,其特征在于,包括针对两种基因序列的突变位点的PCR引物,其序列分别为:SEQ ID No:1-SEQID No:4。
4.一种检测帕尼单抗、西妥昔单抗靶向用药基因突变的试剂盒,其特征在于包括如权利要求3所述的一组检测帕尼单抗、西妥昔单抗靶向用药基因突变PCR引物组。
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