[发明专利]一种分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法

说明书

（一）技术领域

本发明涉及一种中药有效成分分离技术领域，特指一种利用大孔吸附树脂法富集纯化山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法。

（二）背景技术

山豆根为豆科（Leguminosae）槐属植物越南槐Sophora tonkinensis Gagnep.的干燥根及根茎，主产于广西、贵州、云南、广东、江西等地，其味苦、性寒，为清热解毒、消肿利咽之要药，主治火毒蕴结、咽喉肿痛、齿龈肿痛等症。现代药理研究表明山豆根具有抗病毒、抗肝损伤、抗肿瘤等作用，其含有的黄酮和生物碱两大类成分主要为这些药理活性的物质基础。

经检索，现有专利中，CN1994364A的发明专利是通过调节溶液pH，使用二次大孔吸附树脂柱色谱法，收集40%-60%乙醇洗脱液作为山豆根提取物；CN101347497A的发明专利是通过有机溶剂提取，硅胶柱层析结合制备液相色谱分离得到山豆根中的一些有效成分；CN101278969A的发明专利是使用聚苯乙烯型阳离子交换树脂对山豆根水提物中非生物碱部位进行制备。而采用大孔吸附树脂分离富集山豆根的95%乙醇提取物，制备山豆根中具异戊烯基黄酮部位的研究尚未见报道。

（三）发明内容

本发明的目的是提供一种一步柱层析即可得到山豆根中具异戊烯基黄酮部位的分离富集方法，具有简单、快速、成本较低的特点。

为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法，包括如下步骤：使山豆根的乙醇提取液通过大孔吸附树脂进行柱色谱分离，所述大孔吸附树脂为大孔吸附树脂D101或大孔吸附树脂AB-8，依次用40%-50%乙醇、80%-95%乙醇洗脱，收集80%-95%乙醇洗脱液，浓缩至浸膏状，干燥得到山豆根中具异戊烯基黄酮部位。

本发明所述的山豆根的乙醇提取液是以山豆根药材为原料，以乙醇为提取试剂，通过常规提取方法获得，其中控制山豆根的乙醇提取液中的乙醇浓度为20%-40%。本发明具体推荐所述的山豆根的乙醇提取液通过如下方法获得：将山豆根药材粉碎，加入8~20倍的70%-95%乙醇（优选为95%乙醇），回流提取，提取液过滤，取滤液浓缩至乙醇浓度为20%-40%，即得山豆根的乙醇提取液。作为优选，将山豆根药材粉碎至40~200目。作为优选，回流提取2~3次，每次60~90分钟，以充分提取山豆根中的有效成分。

作为优选，柱色谱分离过程中，用40%-50%乙醇或80%-95%乙醇洗脱时，每个浓度冲洗8~10个保留体积。

作为优选，柱色谱分离过程中，先用50%乙醇洗脱，再用90%乙醇洗脱。

本发明具体推荐所述的分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法按照如下步骤进行：

（1）将山豆根药材粉碎，加入8~20倍的70%-95%乙醇，回流提取，过滤，取滤液浓缩至乙醇浓度为20%-40%，得到山豆根的乙醇提取液；

（2）将山豆根的乙醇提取液通过大孔吸附树脂，依序用40%-50%乙醇、80%-95%乙醇洗脱，每个浓度冲洗8~10个保留体积，收集80%-95%乙醇洗脱液；

（3）将步骤（2）获得的80%-95%乙醇洗脱液减压浓缩至浸膏状，经真空干燥或冷冻干燥成干粉，即得山豆根中具异戊烯基黄酮部位。

本发明进一步推荐所述的分离富集山豆根中具异戊烯基黄酮部位的方法按照如下步骤进行：

（1）将山豆根药材粉碎，加入8~20倍的95%乙醇，回流提取2~3次，每次60~90分钟，过滤，取滤液浓缩至乙醇浓度为20%-40%，得到山豆根的乙醇提取液；

（2）将山豆根的乙醇提取液通过大孔吸附树脂，依序用50%乙醇、90%乙醇洗脱，每个浓度冲洗8~10个保留体积，收集90%乙醇洗脱液；

（3）将步骤（2）获得的90%乙醇洗脱液减压浓缩至浸膏状，经真空干燥或冷冻干燥成干粉，即得山豆根中具异戊烯基黄酮部位。

本发明中的乙醇浓度均为体积浓度。

与现有技术相比，本发明的有益效果主要体现在： 

（1）本发明所述的方法采用高浓度乙醇提取，大孔吸附树脂分离富集的工艺简单，高效，过程简便，目标明确，适合工业生产；

（2）本发明整个工艺过程中，除使用乙醇外，未带入其他外源物质，并且在减压浓缩过程中可除去；未使用其它任何毒性有机溶剂，安全、环保；

（3）本发明所用树脂均可再生并重复使用，有利于降低工艺的成本。

（四）附图说明