[发明专利]一种施压检测棉花苗期到花铃期矿质养分循环的方法

权利要求书

1.一种施压检测棉花苗期到花铃期矿质养分循环的方法，其特征在于：按步骤实施：

步骤1棉花育苗与移栽：

1）种子消毒，置于恒温箱内，保持25度恒温下培养，种子发芽，达到2-3厘米，即移栽到容器中，每一容器定植一株；其中塑料容器的直径11 cm、高23 cm，不锈钢容器直径11 cm、高23 cm，同时装有粒径为0.25-0.5mm石英砂，底部有小孔； 

2）幼苗移栽到压力罐时，要从压力罐盖的下方将两片子叶塞入洞口，小心不能损伤子叶，塞入后在放直，同时保证棉花种子根的垂直状态和压力罐的洞口一致，让子叶展开从压力罐上部的洞口处伸出，如图1；

步骤2 棉花温室栽培：

棉花移苗后1d不光照，第2 d打开培养灯，生长期间浇灌营养液，营养液的起始pH值为6.0，营养液开始使用正常浓度的1/2，三天后换成完全营养液，以后2d浇灌一次营养液；棉花进入花铃期后每天浇灌营养液，塑料容器营养液直接浇入，不锈钢容器用针管注射营养液；两种不同培养皿中的营养液的施用量和其生长条件保持一致；

步骤3木质部汁液的收获：

棉花木质部培养80-100天，即棉花生长到13叶龄时取样，收集节位按照果枝节位分层；1-3果枝节位为下层，4-7果枝节位为中层，7以上为上层，主茎叶和果枝叶分类也如此分三层：1-3主茎叶和果枝叶下层叶，4-7主茎叶和果枝节位为中层，7以上主茎叶和果枝叶为上层叶，每层植株样品分基茎、主茎、主茎叶片、果枝，果枝叶片，花蕾铃、根部取样，用去离子水冲洗干净，于105℃下杀青30分钟，然后在70℃烘至恒重，用于养分分析；

其中取样步骤：

1）棉花的叶片每次收集时间间隔4-6天，在叶片主脉近轴端用刀片横向切断主脉，然后靠主脉两侧分别向叶基部方向纵切大约0.5cm，切面用去离子水冲洗，取直径为1.5cm长的干净小塑料管套在主脉上，同时用硅胶密封塑料管与脉间的缝隙；

2）将培养的棉花植株放入不锈钢的压力室中，增压1.6bar，然后每2分钟加压0.2bar，直到第一滴木质部汁液排出，收集到平衡压时，再增压1.0bar，其中平衡压的花铃期范围在4.1-6.2Pa，收集1-1.5毫升汁液的时间范围为85-120分钟，将收集到的汁液放入5ml离心管中,置于-20℃以下冰浴，待测。