[发明专利]一株肠膜明串珠菌及其胞外多糖与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株新的肠膜明串珠菌菌株及其胞外多糖，以及该胞外多糖的制备方法和应用。 

背景技术

微生物胞外多糖是指某些特定微生物（如乳酸菌、土壤杆菌、根瘤菌等）在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的一类糖类化合物，其中，依附于微生物细胞壁外的多糖被称为荚膜多糖，而粘液多糖则以渗透于生长环境中的形式存在。 

微生物胞外多糖不但可以赋予发酵乳制品特殊的风味，还具有一定的降血脂、免疫调节和抗肿瘤等保健功能。更重要的是，随着生活质量的不断提高，与我们每个人日常生活息息相关的一些食品添加剂（如增稠剂、乳化剂、稳定剂等）的食品安全问题越来越受到消费者的重视，因此，寻找来源明确、产量稳定、功能多样的新型食品添加剂越来越受到研究者的重视。 

发明内容

本发明的目的是提供一株新的肠膜明串珠菌菌株和由该菌株所产生的胞外多糖，以及该胞外多糖的制备方法和应用。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。 

本发明提供的技术方案之一是：一株肠膜明串珠菌菌株，其是保藏号为CGMCC NO.6432的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株。 

该菌株经16S rRNA基因测序的结果如SEQ ID NO.1所示。 

本发明提供的技术方案之二是：一种肠膜明串珠菌的胞外多糖，所述的胞外多糖为葡聚糖，该胞外多糖的平均重量分子量在974～5230kDa之间。 

本发明中，所述的胞外多糖为一种纯白色的丝状物或粉末；5.0mg/mL的所述胞外多糖水溶液澄清透明、无色、无味，pH值为6.0～7.1。 

本发明中，所述的胞外多糖可以由前述保藏号为CGMCC NO.6432的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株产生，也可以由其它的可以产胞外多糖的肠膜明串珠菌菌株产生。较佳地，所述的胞外多糖由前述保藏号为CGMCC NO.6432的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株所产生。 

本发明提供的技术方案之三是：一种如前所述的肠膜明串珠菌的胞外多糖的制备方法。 

本发明中，所述的制备方法可以是将所述的肠膜明串珠菌按照现有技术内常规的培养方法培养得到发酵液，然后将发酵液采用常规的多糖分离方法分离得到胞外多糖。 

较佳地，所述的制备方法包括如下步骤： 

（1）将肠膜明串珠菌的种子液以体积比0.5～4.0%(v/v)的接种量接种于无菌培养基，于25～34℃培养24～120h得发酵液；其中，所述的无菌培养基为含有质量比为6.0～12.0%(w/w)脱脂乳粉和质量体积比为2.5～10.0%(w/v)蔗糖的脱脂乳蔗糖溶液，并在95～135℃下灭菌20～30min制成； 

（2）将步骤（1）所得的发酵液在95～100℃加热10～30min，冷却至15~25℃后，调节pH至4.4～4.8，静置3～5h，离心取上清，加入2～4倍体积的80～100%乙醇于离心后的上清液中，静置4～24h，离心收集沉淀物并将沉淀物溶于水，得沉淀物的水溶液； 

（3）将步骤（2）所得的沉淀物水溶液干燥后即得胞外多糖粗品。 

本发明中，所述的胞外多糖粗品包括85～95%的前述肠膜明串珠菌胞外多糖和5～15%的游离蛋白，所述的百分比为质量百分比。 

本发明中，较佳地，步骤（1）所述的肠膜明串珠菌的种子液为前述保藏号为CGMCC NO.6432的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株的种子液。 

本发明步骤（1）所述的无菌培养基打破了常规纯化学培养基发酵明串 珠菌的局限性，创新性地运用脱脂乳蔗糖溶液作为明串珠菌的发酵基料，在降低物料成本的同时，令发酵条件更简单可行。与传统的纯化学培养基相比，天然来源的培养基料经明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)发酵而获得的胞外多糖更具食品安全保障性，而且，使用脱脂乳蔗糖溶液培养明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)获得的发酵液中胞外多糖的产量显著提高。