[发明专利]一株具有立体选择性脂肪酶活性的酵母菌及其生物拆分制备S-型利斯的明的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一株具有立体选择性脂肪酶活性的酵母菌，及利用其进行生物拆分制备S-型利斯的明的方法，属生物化工领域。 

背景技术

阿尔茨海默症(AD)是1907年德国神经病理学家阿尔茨海默首次发现并报道的，是一种进行性神经退化疾病，其特征是记忆和认知功能渐进的损伤。已成为年龄在65岁以上的人第四大死亡原因。轻中度的阿尔茨海默症(AD)表现为轻度语言、记忆功能障碍，但并未完全丧失自理能力；重度阿尔茨海默症(AD)则基本丧失语言表达、认知和记忆能力，甚至出现大小便不能自理的现象，已失去自理能力。1993年我国制订的诊断阿尔茨海默症(AD)标准1. 通过智力检测证实为痴呆；2. 有2项及更多项的识别功能障碍；3. 记忆和识别障碍进行性逐渐加重；4. 无意识障碍；3. 40岁至90岁时发病；4. 没有其他躯体或脑部疾病。 

目前，阿尔茨海默症已经成为主要的公共健康问题。据统计，年龄大于80岁的人口中有20%受到阿尔茨海默症的侵害。而阿尔茨海默症患病的百分比随着年龄的增长而变大：65~75岁患病者为该年龄段人口的1%，而80岁患病者高于该年龄段人口的8%。据报道，阿尔茨海默症是仅次于癌症和心脏疾病之后的第三种威胁人类健康的疾病^[。此外，年龄超过65岁的痴呆症患者中约有50~60%是阿尔茨海默症患者，女性发病率较男性略高。阿尔茨海默症对人类健康的危害和医疗费用的增加都使得寻找一种有效的治疗方案显得尤为重要。 

利斯的明（Rivastigmine），又称卡巴拉汀， 化学名(S)-N-乙基-[3-（1-二甲基氨基）乙基]-N-甲基-氨基甲酸苯酯，结构式如式1，是氨基甲酸酯类脑选择性乙酰胆碱酯酶抑制剂，选择性地作用于大脑区域内并有较长持续时间的活性。 

它的酒石酸盐的商标名称为氨基甲酸铵 Exelon。1997年在瑞士上市，2000年经FDA批准在美国上市，其后在世界160多个国家上市，我国SFDA(国家食品监督管理局)也于2000年批准Exelon胶囊在国内上市。利斯的明对轻中度阿尔茨海默症（AD）有温和节制作用，对帕金森症^]和路易小体引起的痴呆症以及血管性痴呆^[也具有良好的治疗效果。临床证明其安全性和耐受性较好，没有肝脏毒性，是唯一不经过P450酶代谢的药物，其疗效较其他胆碱酯酶抑制剂更好。 

式1 S-型利斯的明的结构式 

迄今为止，得到单一构型S-型利斯的明途径有：手性酸拆分外消旋体（参考文献：(S)-N-乙基-N-甲基-3-[1-(二、甲胺基)-乙基]-氨基甲酸苯酯及其酒石酸盐的制备方法，WO2007025481, 2007-03-08）；过渡金属催化（参考文献：M. Hu, F.-L. Zhang and M.-H. Xie, Novel Convenient Synthesis of Rivastigmine[J]. Synth. Commun., 2009, 39: 1527~1533； Alessandro A. Boezio, Julien Pytkowicz, Alexandre Co te′ , and Andre′ B. Charette Asymmetric, Catalytic Synthesis of γ-Chiral Amines Using a Novel Bis(phosphine) Monoxide Chiral Ligand[J]. J. AM. CHEM. SOC. 2003, 125:14260~14261.）；脂肪酶催化拆分羟基中间体（参考文献：Juan Mangas-Sanchez, Mar′a Rodr′guez-Mata, Eduardo Busto.Chemoenzymatic Synthesis of Rivastigmine Based on Lipase-Catalyzed Processes[J]. J. Org. Chem. 2009, 74:5304~5310.）。这些方法都具有一定的缺陷，复杂的合成步骤、金属中的杂质以及多步手性盐的重结晶过程等。