[发明专利]一种黑海参糖胺聚糖的制备方法无效
申请号: | 201210585724.8 | 申请日: | 2012-12-30 |
公开(公告)号: | CN102993327A | 公开(公告)日: | 2013-03-27 |
发明(设计)人: | 姜相君;姜曼;李雪洁;林中华;宣世英;辛永宁 | 申请(专利权)人: | 青岛市市立医院 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 山东清泰律师事务所 37222 | 代理人: | 聂磊 |
地址: | 266000*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 海参 聚糖 制备 方法 | ||
1.一种黑海参糖胺聚糖的制备方法,其特征在于:包括下列步骤:步骤一:黑海参预处理;步骤二:碱解黑海参体壁;步骤三:双酶酶解黑海参体壁;步骤四:酶解完毕后,用三氯乙酸去除双酶酶解液中的蛋白质;步骤五:用乙醇沉淀黑海参糖胺聚糖;步骤六:干燥黑海参糖胺聚糖粗糖;步骤七:用纤维素离子交换柱层析法纯化黑海参糖胺聚糖;步骤八:双氧水脱色;步骤九:用乙酸钾沉淀黑海参糖胺聚糖;步骤十:干燥黑海参糖胺聚糖精糖。
2.根据权利要求1所述的一种黑海参糖胺聚糖的制备方法,其特征在于:所述步骤七的具体步骤为:将50g 二乙氨基乙基纤维素用缓冲液浸泡过夜,脱气后装柱,用2倍柱床体积的缓冲液平衡;将30mg糖胺聚糖粗糖用10mL缓冲液在40~60℃下溶解上柱,用缓冲液和1.5mol/L的NaCl各150mL梯度洗脱,流速采用8mL/h,以3mL/管收集;用阿利新蓝比色法检测各管总糖胺聚糖的含量,收集有洗脱峰部分的样液,透析脱盐后,旋转蒸发器浓缩。
3.根据权利要求2所述的一种黑海参糖胺聚糖的制备方法,其特征在于:所述缓冲液采用0.5mol/L的NaAC/HAC,其pH为6.0~6.5。
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