[发明专利]一种用于水环境改良的复合菌生产方法

说明书

技术领域

本发明属于应用生物技术领域，涉及一种水环境改良的微生物复合菌及其生产方法。 

背景技术

水是生命之源，人类的生存活动都离不开水。水安全关系到人民群众身体健康和经济社会可持续发展，是环境保护工作的重中之重。世界卫生组织(WHO)调查表明，全世界80％的疾病和50％的儿童死亡都与饮用水水质不良有关。饮用水不良水质导致的疾病多达50多种。 

作为90％以上的饮用水源：湖泊、水库和河流，主要表现在：1.水源地富营养化问题突出，总氮，总磷超标；2.水源自身动、植物新陈代谢产生大量残骸，无法用传统方法根除。3.水体中致病微生物增多。4.水体环境富营养化严重，导致藻类大量繁殖。而死亡的藻类残体悬浮于水体中，通过传统水处理方法很难根除，成为饮用水质有机物超标的重要因素。 

河流型水源地由于人类生活，高浓度有机污水，工业废水的流入，也极易发生突发性水污染事件，直接威胁水体环境安全。 

近几年微生物制剂在水环境改良方面已有所应用，但存在着很多问题，如一些微生物不能产生酶，只是单纯的吸收水体的小分子营养物质，不能有效地促进水体环境的物质循环，效果比较慢。菌种单一，每一种微生物在水体物质循环的环节中的作用不同，经过实验表明，复合菌效果和处理效率远大于单一菌种。 

发明内容：

本发明的目的是针对上述微生态制剂在水体环境改良上存在问题，提供一种含生物酶的，含多种微生物细菌的水环境改良微生物复合菌。 

本发明的另一个目的是提供上述水环境微生物复合菌的生产方法。 

本发明的目的是通过下列技术措施实现的：一种水环境改良微生物复合菌，该复合菌各组分微生物在微生物总质量中的质量百分比为：枯草芽孢菌30～40％，地衣芽孢杆菌30～40％，放线菌10～20％，反硝化细菌10～20％，光合细菌10～20％。具体产品中所述个微生物组分之和为100％。 

所述的水环境微生物复合菌，每克或每ml该微生物复合菌中菌含量不低于6.0×10⁸CFU，蛋白酶活性不低于300U，淀粉酶含量不低于200U. 

所述的水环境微生物复合菌的制备方法，该方法是将各组分微生物分别培养再按一定比例混合制成微生物复合菌。 

所述的水环境微生物复合菌的制备方法，包括下述步骤： 

a.一级种子液的制备：分别将活化的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、反硝化产碱杆菌菌种接种到无菌的ph7.0～7.5的营养肉汤中，放线菌接种在灭菌的淀粉液体培养基中，30～37℃，150～200rpm，过夜培养；光合细菌在光合细菌液体培养基中，30～37℃，光照培养4～7天，光照强度1000～2000Lx，获得各菌种的一级种子液； 

b.二级种子液发酵：分别将步骤a所培养的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、反硝化产碱杆菌、放线菌一级种子液按发酵罐体积10～15％的接种量接入发酵罐，培养基同步骤a所用，30～37℃，150～200rpm，通入经0.45μm滤膜过滤的过滤空气，通气量为发酵罐体积0.5-1倍/min，压力在0.1～1MPa，发酵12～18小时； 

c.生产液发酵：分别将二级种子液打入发酵罐中，培养基同步a所用，接种量为发酵罐体积的8-12％，30～37℃，150～200rpm，通入经0.45μm滤膜过滤的过滤空气，通气量为发酵罐体积0.8-1倍/min，压力在0.5～1.0MPa，发酵24～36小时；光合细菌直接将一级种子液接种到透明的装有光合细菌液体培养基的发酵罐中，接种量为发酵罐体积的8～12％，30～37℃，光照培养4-7天，光照强度1000-2000Lx； 

d.单独发酵完成后将发酵液装入贮液罐，按照各组分微生物在微生物总质量的质量百分比取枯草芽孢杆菌30％～40％，地衣芽孢杆菌30％～40％，放线菌10～20％，反硝化细菌10～20％，光合细菌10～20％混合制成液体微生物修复剂； 

或者将单独发酵的发酵液通过离心或者加载体吸附，形成固体，按照各组分微生物在微生物总质量中的质量百分比取枯草芽孢杆菌30％～40％，地衣芽孢杆菌30％～40％，放线菌10～20％，反硝化细菌10～20％，光合细菌10～20％混合制成固体微生物复合菌。 

所述的水环境微生物复合菌的制备方法，步骤d中液体微生物复合菌剂的菌含量不低于6.0×10⁸CFU/ml，蛋白酶活性不低于300U/ml，淀粉酶含量不低于200U/ml。 

本发明有益效果：