[发明专利]一种从螺旋藻中提取脱镁叶绿酸A的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种从螺旋藻中提取脱镁叶绿酸A的方法。

背景技术

螺旋藻是一种低等植物，属于蓝藻门，颤藻科，其结构简单，细胞内没有真正的细胞核，在显微镜下可见其形态为螺旋丝状故得名螺旋藻。螺旋藻共有35种，繁殖力强，适于广泛种植，便宜易得。螺旋藻中含有丰富的叶绿素A，具有独特的造血净血功能，并具有安全性和高消化吸收率，经中国卫生部和美国食品药品管理局认证螺旋藻完全无毒副作用，是安全的植物药品及保健品。

脱镁叶绿酸A为一种光敏剂，可以用于通过光动力学治疗肿瘤或研发新型抗菌药，其分子式如下所示：

美国科学家利于脱镁叶绿酸A制备了2-[1-己氧基乙基]-2-去乙烯基焦脱镁叶绿酸A，这是一种脱镁叶绿酸A的衍生物，研究表明其具有治疗肿瘤的效果好，毒副作用小的特点。

再者脱镁叶绿酸A具有良好的抑菌作用，对大肠杆菌原生质具有再生的作用，对金黄色葡萄球菌具有抑制作用，故脱镁叶绿酸A具有广泛的医用价值和市场价值。

合成制备脱镁叶绿酸A的起始原料来源于一种海洋藻类植物，或者人工合成叶绿酸A，植物资源较少，导致最终的产品生产成本很高。近年来，国内外科学家陆续发明了采用原材料价格比较低廉的植物进行合成制备脱镁叶绿酸A，中国申请号为：200610020877.2，名称为“从蚕沙中制取铜叶绿酸盐的方法”的专利，利用蚕沙为原材料制备铜叶绿酸盐产品，中国申请号为：200810084616.6，名称为“一种从水华蓝藻中制备脱镁叶绿酸A甲酯的方法”的专利，其生产工艺较为复杂，对原材料要进行较为复杂的处理，比如进行冷冻固化处理，在提取过程中需要加入10倍以上的溶剂，并采用二氯甲烷等有机溶剂萃取，整个工艺复杂，成本较高，且不环保。

发明内容

为了克服上述问题，本发明提供了一种从螺旋藻中提取脱镁叶绿酸A的方法，该方法工艺简单，成本低廉，环境友好。

本发明的技术方案是通过以下技术方案来实现：

一种从螺旋藻中提取脱镁叶绿酸A的方法，包括以下步骤：

1）将螺旋藻中的叶绿素转化为叶绿酸；

2）用有机溶剂提取叶绿酸A；

3）用氢离子取代所提取的叶绿酸A中的镁离子，得到脱镁叶绿酸A粗品；

4）采用重结晶的方法对脱镁叶绿酸A粗品进行纯化，得到纯化的脱镁叶绿酸A。

所述的将螺旋藻中的叶绿素转化为叶绿酸为：

将螺旋藻粉碎后，将螺旋藻粉制成悬浊液，加入叶绿素酶后，于至40～50℃保温处理至少1h，将螺旋藻中的叶绿素转化为叶绿酸。

所述的叶绿素酶与螺旋藻粉的质量比为1～5:10000。

所述的有机溶剂为C₃～C₅的酮、C₂～C₆的醚或C₂～C₈的烷烃醇。

所述的有机溶剂为丙酮、乙醇或乙醚。

所述用氢离子取代所提取的叶绿酸A中的镁离子为：

调节叶绿酸A的提取液的pH值为2～3，充分搅拌，以氢离子取代镁离子，生成脱镁叶绿酸A。

所述将脱镁叶绿酸A粗品用异丙醇进行重结晶得到纯化的脱镁叶绿酸A。

所述的从螺旋藻中提取脱镁叶绿酸A的方法，具体包括以下步骤：

1）将螺旋藻粉与其质量2～5倍的水混合，配成螺旋藻粉悬浊液，然后加入叶绿素酶，升温至40～50℃，保温处理1～3h后，得酶解液；所述叶绿素酶与螺旋藻粉的质量比为1～5:10000；

2）向酶解液中加入有机溶剂采用回流的方法提取2～3次提取叶绿酸A，每次1～3h，合并提取液得到叶绿酸A提取液；所述的有机溶剂为C₃～C₅的酮、C₂～C₆的醚或C₂～C₈的烷烃醇，用量为螺旋藻粉质量2～5倍；

3）调节叶绿酸A提取液的pH值为2～3后，充分搅拌，以氢离子取代镁离子，生成脱镁叶绿酸A；让浓缩去除有机溶剂，过滤得到的固体为脱镁叶绿酸A粗品；

4）将脱镁叶绿酸A粗品用异丙醇进行重结晶得到纯化的脱镁叶绿酸A；所述异丙醇用量为螺旋藻粉质量的2～5倍。

所述将干燥后的螺旋藻粉碎，过20目筛，得到螺旋藻粉。

所述的有机溶剂为丙酮；采用稀盐酸、稀硫酸或稀磷酸调节pH值。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：