[发明专利]一种测定CoQ10抑制紫外光B辐射损伤的方法

权利要求书

1.一种测定CoQ10抑制紫外光B辐射损伤的方法，其特征在于，测定步骤如下：

（1）CoQ10用水、甲醇、乙醇、DMSO溶解；

（2）HaCat细胞用完全培养基调整细胞浓度为4-10×10⁴/孔，接种于细胞板中，贴壁后换用1％、2％、3％、5％的低血清培养基，同时加入（1）所述的CoQ10溶液，CoQ10终浓度为1uM、5uM、10uM；并使用浓度为5mJ/cm²或20mJ/cm²的UVB照射，分别以照射后4h－24h不同时间点为观察时间点；

（3）HaCat细胞培养4h--24h后，用ELISA试剂盒检测各组细胞内CPDs的含量；CoQ10剂量相关性的检测；

（4）所述HaCat细胞UVB辐射6h--24h，提取RNA，QPCR检测细胞因子IL-1α、IL-6、IL-8和TNF-α基因表达水平；

所述HaCat细胞UVB辐射6h--24h，采用Luminex检测试剂盒检测细胞因子IL-1α、IL-6、IL-8和TNF-α分泌情况；

（5）所述HaCat细胞UVB辐射6h后，采用western-blot方法检测各组NF-κB表达情况。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的CoQ10剂量相关性的检测包括：六孔板培养HaCat细胞，选取照射后继续培养4h和24h作为观测时间点，每个时间点都设六组：UVB未照射组（-UVB）、单纯UVB照射组（UVB）、微载体组（NLC）、CoQ10剂量1μM组（UVB+1μM）、CoQ10剂量5μM组（UVB+5μM）、CoQ10剂量10μM组（UVB+10μM），每个组重复两个孔，每个孔接2×10⁵的细胞量，共需4块六孔板，4.8×10⁶的细胞量；

照射剂量为5mJ/cm²，4h-24h之后分别收集细胞，用试剂盒提取DNA，采用硫酸鱼精蛋白ELISA法检测CPDs。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的CoQ10具有生物活性物质特点CoQ10。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的生物活性物质特点是一种脂溶性醌,其结构类似于维生素K，因其母核六位上的侧链——聚异戊烯基的聚合度为10而得名，是一种醌环类化合物；分子式C59H90O4，分子量863.36。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的CoQ10具有抑制光辐射损伤的作用；CoQ10的应用是将CoQ10添加入化妆品中，使化妆品具有抑制光辐射的功效；所述的化妆品包括美白爽肤水、面霜、面膜。