[发明专利]一种高产蛋白酶的枯草芽孢杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及菌株，特别涉及一种高产蛋白酶的枯草芽孢杆菌及其在饲料发酵中的应用

背景技术

芽孢杆菌在自然界中分布广泛，一般为好氧或兼性厌氧的革兰氏阳性杆菌，胞内可产生圆形、椭圆形或柱状的内生芽孢。芽孢壁中有皮质层，对热、紫外线和离子辐射及抗菌素具有很高的抗性，可以耐受饲料加工、储藏、耐酸、高温、耐挤压等优点，因此很早便有对芽孢杆菌在饲料中的研究。

枯草芽孢杆菌具有较强的产蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶能力，并能分泌多种抗菌素等次生代谢产物；能通过肠道占位调节动物肠道菌群平衡，改善肠道微生态环境，促进动物健康；能刺激动物免疫器官的生长发育，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高机体免疫力。

20 世纪80 年代开始，一些学者研究用芽孢杆菌作为微生态制剂，现在许多国家已大量使用芽孢杆菌饲料添加剂，如欧洲有些国家、美国、日本等，并取得了丰硕的成果。我国对芽孢杆菌微生态制剂的研究相对较晚，最近几年才进入产业化研制和开发，而且这些产品的菌种相对比较单一、功能性差、易染菌，微生态产品在畜牧养殖中的实际应用效果甚微，产业化发展受到了限制。

发明内容

针对现有技术中存在的缺陷，本发明的目的在于提供一株用于发酵饲料的高产蛋白酶的枯草芽孢杆菌。该枯草芽孢杆菌（Bacillus  subtilis）Hzd-bs-001，已于2012年12月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，保藏号：CGMCC No.6928。它可以用于生物发酵饲料以及动物保健产品，是一种具有较高实际应用价值的益生菌。本发明通过试验表明：枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Hzd-bs-001具有较强分解蛋白的能力，可显著提高畜禽蛋白利用率，能有效的降低畜禽疾病的发病率，平衡肠道菌落，尤其在防治仔猪下痢中有极为显著的作用效果，提高畜禽的免疫力，促进动物健康快速生长。

本发明的优势是：（1）枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Hzd-bs-001是从陈年堆放啤酒糟的土壤中分离出来的，对啤酒糟、酱油糟等蛋白含量较高的生物质有很高的降解率，因在发酵过程中能产生高活性的蛋白酶。（2）枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Hzd-bs-001能极为有效地防治仔猪下痢。 

附图说明：

图1 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Hzd-bs-001菌落形态照片；

图2枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Hzd-bs-001显微镜下形态照片

图3枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Hzd-bs-001 16SrDNA电泳图；

图4枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Hzd-bs-001与Genbank中收录的相通菌株的16SrDNA所构建的系统发育树。

具体实施方式

下述实施例中的方法，如无特别说明，均为常规方法。

下述实施例中的百分含量，如无特别说明，均为质量百分含量。

实施例1

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Hzd-bs-001的获得及其培养条件检测

1、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Hzd-bs-001的筛选与鉴定

1）枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Hzd-bs-001的筛选

（1）从青岛啤酒厂常年堆积啤酒糟的土壤中称取1g土壤置于100ml无菌水中，用玻璃棒搅拌均匀后，再在振荡器上振荡30min，使微生物细胞分散，静置20s～30s，其水溶液为10^-2稀释液，再吸取1ml稀释液于9ml无菌水的试管中，振荡混匀，即为10^-3稀释液，再吸取1ml 10^-3稀释液于9ml无菌水中振荡混匀，即为10^-4稀释液，制成10^-2、10^-3、10^-4系列稀释液。