[发明专利]一种蒲公英总黄酮的分离纯化方法

权利要求书

1.一种蒲公英总黄酮的分离纯化方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

将蒲公英全草粉碎成粗粉，加入机粉质量15～20倍量的85％～100％甲醇回流提取120～180分钟，滤过；滤液回收甲醇后浓缩至3～5波美得浓缩液，然后用体积比1∶1的盐酸∶水溶液将浓缩液pH值调至2.5～3，放置20～40分钟后滤过；滤液上HPD400、HPD100、DM-130或AB-8广谱型大孔树脂吸附柱，吸附完毕用水洗杂质，再用5％～20％的甲醇洗杂质，然后用50％～80％的甲醇洗脱，得总黄酮半成品洗脱液，总黄酮半成品洗脱液回收甲醇后浓缩干燥得总黄酮半成品；将所得总黄酮半成品上硅胶层析柱，并用丙酮甲醇的体积比为1～3∶1的丙酮与甲醇混合物洗杂质，然后用丙酮∶甲醇的体积比为5～7∶1的丙酮与甲醇混合物洗脱，得总黄酮洗脱液；将总黄酮洗脱液进行精制得蒲公英总黄酮。

2.如权利要求1所述的蒲公英总黄酮的分离纯化方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

称取粉碎成粗粉的蒲公英全草，加入粗粉质量20倍量的85％甲醇回流提取180分钟，滤过；滤液回收甲醇后浓缩至5波美得浓缩液，然后用体积比1∶1的盐酸∶水溶液将浓缩液pH值调至3，放置40分钟后滤过；滤液上HPD400型大孔树脂吸附柱，吸附完毕用水洗杂质，再用5％的甲醇洗杂质，然后用50％的甲醇洗脱，得总黄酮半成品洗脱液，总黄酮半成品洗脱液回收甲醇后浓缩干燥得总黄酮半成品；将所得总黄酮半成品上硅胶层析柱，并用丙酮∶甲醇的体积比为1∶1的丙酮与甲醇混合物洗杂质，然后用丙酮∶甲醇的体积比为5∶1的丙酮与甲醇混合物洗脱，得总黄酮洗脱液；将总黄酮洗脱液进行精制得蒲公英总黄酮。

3.如权利要求1或2所述的蒲公英总黄酮的分离纯化方法，其特征在于该方法中所述大孔树脂吸附步骤采用湿法装柱，保留液面，将调pH值后的滤液通过吸附柱，流速每分钟0.05ml/g树脂。

4.如权利要求1或2所述的蒲公英总黄酮的分离纯化方法，其特征在于该方法中所述硅胶层析步骤采用湿法装柱，保留液面，将半成品按重量1∶1拌活化后硅胶，并将拌好的混合物至于硅胶柱上方，洗脱流速每分钟0.1ml/g硅胶。硅胶活化条件为，110摄氏度30分钟。

5.如权利要求1或2所述的蒲公英总黄酮的分离纯化方法，其特征在于该方法中采用活性炭脱色、重结晶方法进行精制，按4g/100ml总黄酮洗脱液加入针剂活性炭，25～40摄氏度搅拌20～40分钟，滤过；滤液回收混合试剂后浓缩干燥得中间体；中间体用7～9倍甲醇40摄氏度热溶，滤过：滤液放凉析出晶体，抽滤得蒲公英总黄酮成品。

6.如权利要求5所述的蒲公英总黄酮的分离纯化方法，其特征在于该方法中精制过程包括如下步骤：

按4g/100ml洗脱液加入针剂活性炭，25摄氏度搅拌40分钟，滤过；滤液，回收混合试剂，浓缩干燥得中间体；中间体用9倍甲醇40摄氏度热溶，滤过：滤液放凉析出晶体，抽滤得蒲公英总黄酮成品。

7.如权利要求6所述的蒲公英总黄酮的分离纯化方法，其特征在于该方法中成品用7倍甲醇重结晶，过滤母液，回收甲醇，浓缩干燥得总黄酮半成品。