[发明专利]一种吸附柱层析纯化乌司他丁的方法有效
申请号: | 201210597955.0 | 申请日: | 2012-12-30 |
公开(公告)号: | CN103073637A | 公开(公告)日: | 2013-05-01 |
发明(设计)人: | 林晓磊;孙建;刘翠珍;孙延年 | 申请(专利权)人: | 青岛九龙生物医药有限公司 |
主分类号: | C07K14/81 | 分类号: | C07K14/81;C07K1/18 |
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地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 吸附 层析 纯化 方法 | ||
1.一种纯化乌司他丁的方法,该方法包括:将乌司他丁粗品通过吸附柱层析、超滤液沉淀、沉淀物冻干步骤进行纯化,所得纯化后的乌司他丁的总收率提高到60%以上,总效价不低于4000iu/mg。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述乌司他丁粗品是通过以男性尿液为原料,将原料依次经过甲壳质吸附、氨水洗脱、硫酸铵盐析制备得到的。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述吸附柱层析包括如下步骤:
(1)用洗脱液A溶解乌司他丁粗品,搅拌、离心,留取离心液,所述洗脱液A为0.01-0.3mol/L的醋酸盐缓冲液;
(2)用洗脱液B平衡吸附柱,将上述离心液上柱,洗脱液B为,0.01-0.5mol/L醋酸钠和0.1-5mol/L NaCl的缓冲液;
(3)用洗脱液B洗脱吸附柱,收集洗脱液;
(4)将洗脱液经超滤膜,加入磷酸盐缓冲液反复超滤,得超滤液。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.01-0.5mol/L。
5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述吸附柱为阴离子交换柱。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述阴离子交换柱包括:强阴离子交换柱Q-Sephadex A-25,Q-Sephadex A-50,Q-Sephadex C-25,Q-Sephadex C-50;弱阴离子交换柱DEAE-Cellulose DE-22,DEAE-Cellulose DE-23,DEAE-Cellulose DE-51,DEAE-Cellulose DE-52,DEAE-Cellulose DE-53。
7.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述超滤液沉淀步骤包括:超滤液中加入乙醇沉淀。
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