[实用新型]一种用于蛇毒特异性抗体筛选的离心浓缩管柱有效
申请号: | 201220047241.8 | 申请日: | 2012-02-13 |
公开(公告)号: | CN202558794U | 公开(公告)日: | 2012-11-28 |
发明(设计)人: | 高建芳;王金;屈彦福;林隆慧;计翔 | 申请(专利权)人: | 高建芳;王金;屈彦福;林隆慧;计翔 |
主分类号: | C07K1/22 | 分类号: | C07K1/22 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 310036 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 蛇毒 特异性 抗体 筛选 离心 浓缩 管柱 | ||
所属技术领域
本实用新型涉及一种用于蛇毒特异性抗体筛选的离心浓缩管柱。
背景技术
目前,世界范围内已有一些国家开展以蛇毒特异性抗体来制备蛇伤快速诊断产品的研究,其中澳大利亚已经生产蛇伤快速诊断试剂盒用于临床检测,为蛇伤的快速判断与治疗作出了积极的贡献。应该说,相关技术/产品的应用都离不开蛇毒特异性抗体的获取,且这种特异性抗体的筛选是以亲和层析为基础,将其中一种蛇毒抗血清流经由其它种蛇毒偶联的层析柱,最终的流出液即为该种蛇毒的特异性抗体。然而,到目前为止,这种蛇毒特异性抗体的筛选仍需借助由各种蛇毒偶联的串联层析柱。此法所需操作时间较长,且每一层析柱需要一定量的亲和介质才能成柱,因此制备成本高。此外,传统的筛选特异性抗体方法回收的产物体系含有大体积缓冲液,产物的浓度较低,需另外借助设备对其进行浓缩。
发明内容
鉴于上述问题,本实用新型提供一种用于蛇毒特异性抗体筛选的离心浓缩管柱。用多种蛇毒偶联的亲和介质装填离心管柱,将由非偶联用蛇毒制备的抗血清加入离心管柱孵育后,直接通过离心快速有效地获得体积小、浓度高的该种蛇毒特异性抗体。
本实用新型的技术方案是:
1.一种用于蛇毒特异性抗体筛选的离心浓缩管柱,其特征在于:包括有盖离心管,所述离心管与管盖间由加长的柄连接,所述离心管内可以嵌入卡口式内管,所述卡口式内管含上、下盖和疏水筛板,所述螺口浓缩管内含超滤膜。
2.一种用于蛇毒特异性抗体筛选的离心浓缩管柱,其特征在于:所述有盖离心管、卡口式内管、内管上下盖和浓缩管为聚丙烯材质,所述疏水筛板为高分子聚乙烯材质,所述超滤膜为再生纤维素材质。
3.一种用于蛇毒特异性抗体筛选的离心浓缩管柱,其特征在于:所述离心管容积为1.5毫升,上半部分呈圆柱形,下半部分呈圆锥形;所述卡口式内管容积为0.5毫升,上半部分比下半部分略粗,能保证下半部分进入离心管,而上半部分架在离心管口上,内管底部呈筛网状;所述疏水筛板孔径为10微米,与内管壁紧密结合;所述浓缩管容积为0.5毫升,呈圆锥形,管壁呈筛网状;所述超滤膜,孔径为0.02微米,能截留30千道尔顿分子量以上蛋白,但能允许水和小分子盐类通过。
4.一种用于蛇毒特异性抗体筛选的离心浓缩管柱,其特征在于:所述卡口式内管底部、内管下盖和浓缩管之间均有螺纹连接。
5.使用方法:将结合有若干种非目的蛇毒的亲和介质(CNBr-activated sepharose 4B)等量混合后,放入卡口式内管,再放入一种目的蛇毒抗血清,令相互间充分结合;随后将内管与浓缩管连接,一起放入离心管离心,收集浓缩管中余液即为目的蛇毒区别于其它种蛇毒的浓缩后的物种特异性抗体。
本实用新型的有益效果是:结构简单,操作方便;所需耗材量较传统制备方法少,有效降低了成本;能一步实现蛇毒特异性抗体的筛选和浓缩,有效节省了时间。
本实用新型已列入杭州市属高校重点实验室科技创新项目(项目合同号:20080433T03)和浙江省科学技术厅重大科技专项项目(项目合同号:2009C13045)。
附图说明
图1是本实用新型的结构示意图。
图中1是离心管;2是卡口式内管;3是疏水筛板;4是内管下盖;5是内管上盖;6是浓缩管。
具体实施方式
下面结合实施例来具体说明本实用新型
实施例:
筛选银环蛇毒区别于眼镜蛇、五步蛇和短尾蝮蛇毒的物种特异性抗体。取0.1毫升等量混合的眼镜蛇、五步蛇和短尾蝮蛇毒结合的亲和介质(CNBr-activated sepharose 4B),放入底部旋紧的卡口式内管。加入5毫克抗银环蛇毒血清,盖紧上盖。室温下,置于水平摇床上摇动2小时,令抗体与蛇毒充分结合。随后,打开上下盖,将卡口式内管与浓缩管连接,放入离心管中,盖上盖子。在3000g 4℃下离心15分钟,随后收集浓缩管中余液即为银环蛇毒区别于眼镜蛇、五步蛇和短尾蝮蛇毒的浓缩的物种特异性抗体。
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