[实用新型]检测人γ干扰素的胶体金免疫试纸

说明书

技术领域

本实用新型涉及通过检测人体血液中的γ干扰素，诊断人是否患有结核病，属于胶体金免疫诊断技术领域，更具体地，涉及一种检测人γ干扰素的胶体金免疫试纸。 

背景技术

结核病是由结核分支杆菌引起的、人兽共患的慢性消耗性传染病，给人类健康带来严重的威胁。结核病可累及全身多个脏器；但以肺结核最为常见，排菌病人是社会传染源。人体感染结核杆菌后不一定发病，仅于抵抗力低下时方始发病。据研究，全世界有超过1/3的结核杆菌感染者，受结核杆菌感染的人群中，10%的人会发展为结核病。该病病理特点是结核结节和干酪样坏死，易形成空洞。除少数可急起发病外，临床上多呈慢性过程。常有低热、乏力等全身症状和咳嗽、咯血等呼吸系统表现。据世界卫生组织2005年的统计数据，结核病造成了全球880万新发病例和160万例死亡（WHO/HTM/TB/206.362）。 

对结核病一定要早诊断、早治疗，早期治疗以免组织破坏，造成修复困难，例如，肺结核早期、肺泡内有炎症细胞浸润和纤维素渗出，肺泡结构尚保持完整、可逆性大。同时细菌繁殖旺盛，体内吞噬细胞活跃，抗痨药物对代谢活跃生长繁殖、旺盛的细菌最能发挥抑制和杀灭作用。且早期治疗可利于病变吸收消散不留痕迹。而有效筛检感染者对于结核病的早期防治极其重要。 

现有对于结核杆菌感染者的诊断，采用结核菌素试验、痰涂片抗酸染色、痰菌培养、或血清学诊断等方法，但这些方法存在敏感性低、技术复杂、费用高、且缺乏特异性等问题。 

目前，通过检测人体血液中的γ干扰素，诊断人是否患有结核病在结核病诊断中越来越受到重视。γ干扰素（IFN-γ）是CD4+THI细胞、CD8+细胞毒性T细胞和NK细胞等在抗原（细菌、病毒等）及有丝分裂原（ConA和PHA等）刺激下产生的一种细胞因子。IFN-γ具有抗感染性、抗肿瘤活性和免疫调节作用，如活化巨噬细胞、提高MHC Ⅰ类和Ⅱ类分子的表达、促进抗原提呈等，在机体抗感染与免疫中发挥重要作用。当结核分支杆菌感染人体后，首先会被人体的免疫系统识别，激活机体的T细胞免疫应答，分泌产生IFN-γ，抗原特异的IFN-γ产生量与机体是否感染密切相关。基于IFN-γ与感染之间的密切联系，医学及兽医学均利用病原体特异性抗原体外刺激单核细胞产生IFN-γ进行传染病诊断。 

IFN-γ检测方法主要有用抗病毒感染的方法检测干扰素、诱导MHCⅡ类抗原表达的方法、免疫学方法、分子生物学方法检测。 

在中国专利公开CN101493454A、CN102297968A中，分别公开了利用IFN-γ诊断结核病的试剂盒，但这些试剂盒操作复杂、费时。 

另外，胶体金免疫快速诊断技术是一种固相标记新型免疫检测技术，以胶体金作为示踪物或显色剂，将胶体金标记在抗体上，再利用抗原抗体的反应原理，将金颗粒连接到抗原上，当抗原抗体反应达到一定程度时，出现肉眼可见的显色结果。采用胶体金免疫诊断技术，对抗体的生物活性影响小，干扰检测结果的因素小，具有广泛的应用前景。 

目前，对于结核病的诊断，寻求能够早期、快速、简便地检测出人是否受到结核杆菌感染的有效检测手段。 

实用新型内容

本实用新型所要解决的技术问题在于提供了一种检测人γ干扰素的胶体金免疫试纸，从而通过胶体金免疫法检测人体血液中的γ干扰素，从而体外定性检测人是否患有结核病。 

本实用新型的检测人γ干扰素的胶体金免疫试纸，包括：底板，依次相连设置于所述底板上的样本垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、以及吸水垫，在所述硝酸纤维素膜上设有控制线和包被亲和素的检测线，所述胶体金垫上设有位于靠近所述样本垫一侧的生物素标记的多克隆抗体线以及位于靠近所述硝酸纤维素膜一侧的胶体金标记的单克隆抗体线，所述多克隆抗体与所述单克隆抗体是通过免疫原筛选出的与人γ干扰素具有亲和作用的配对抗体。 

本实用新型基于使用特异性的抗原（如结核分支杆菌ESAT-6）刺激疑似患者的血液后，患者和非患者的血液中产生的γ干扰素浓度达到100倍的差异，通过胶体金免疫方法检测一定浓度的人γ干扰素，进而确定使用者是否受到结核杆菌的感染。 

采用本实用新型，由于胶体金垫上的多克隆抗体和单克隆抗体是通过免疫原筛选出的一对配对抗体，且在测试中与样本中的人γ干扰素具有亲和作用，因而可利用双抗体夹心方法，根据检测线上的亲和素与双抗体夹心结合物的反应，有效地对人体血液中的人γ干扰素进行检测，从而诊断出人是否受到结核杆菌的感染。 

在本实用新型中，也可以，所述样本垫是全血样品垫。