[实用新型]25羟基维生素D检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及检测试剂盒，特别是涉及25羟基维生素D检测试剂盒。

背景技术

人体和动物每天必需从食物中摄取适量的维生素D，才能维持正常的发育和健康。成人的建议每日摄取量是5μg，妊娠期和哺乳期女性应当增加1倍左右的摄入量，每天手脚露30厘米，在阳光下晒30分钟，有效的防止维生素D的缺乏。但维生素D摄食过量会引起中毒，一些学者认为长期每日摄入25μg维生素D可引起中毒，这其中可能包括一些对维生素D敏感的人，但长期每天摄入125μg维生素D则肯定引起中毒。我国制定维生素D可耐受最高摄入量为20μg。

25(OH)VD是最主要的血清VD的存在形式，其血清浓度反应了机体中可利用的VD的状态，其结果的可靠性要优于检测血清1,25(OH)VD水平。血清25(OH)VD浓度随年龄而降低。老年人日照相对减少，老化皮肤产生VD数量下降，及不充分的饮食摄入，造成老年人普遍缺乏VD，增加了患骨质疏松症的风险。因此，检测25(OH)VD血清浓度可以辅助临床对VD缺乏状态的评估，也可用于检测患者非正常血清钙水平的原因。

目前25羟基维生素D检测试剂盒主要是以进口产品为主，稳定性较好的产品主要是酶联免疫法和放射性免疫法类产品。放射性免疫法检测25羟基维生素D试剂盒存在需操作经验丰富的检验员，存在放射性污染的问题，使用范围受到限制。目前通常使用的利用酶联免疫法检测25羟基维生素D的试剂盒的血清样本需要稀释才可加样，操作时间比较长，操作方法步骤比较繁琐。

实用新型内容

基于此，有必要提供一种敏感度高、特异性强、操作简便、稳定性好，无污染、重复性好的25羟基维生素D检测试剂盒。

一种25羟基维生素D检测试剂盒，包括盒体，盒体内主要有：具有放置试剂瓶的下凹瓶位、位于下凹瓶位上的试剂瓶、以及置于塑料框架中的微孔板，所述微孔板的微孔内包被有高特异性鼠25羟基维生素D单克隆抗体层，所述高特异性鼠25羟基维生素D单克隆抗体的量为0.1～0.5μg；所述试剂瓶包括装有浓度为0.1μg/ml的生物素标记的25羟基维生素D的试剂瓶和装有工作浓度为0.5～2.0μg/ml的辣根过氧化酶标记的抗生物素蛋白的试剂瓶。

在其中一个实施例中，所述试剂瓶还包括有：6瓶分别装有25羟基维生素D标准品的试剂瓶，2瓶分别装有25羟基维生素D质控品的试剂瓶，1瓶装有底物溶液的试剂瓶，1瓶装有终止液的试剂瓶和1瓶装有冲洗液的试剂瓶。

在其中一个实施例中，所述试剂盒还包括有检测时用于密封微孔板的封口膜。

本实用新型的25羟基维生素D检测试剂盒是采用竞争法原理定量测定人血清或血浆中的25羟基维生素D和其他羟基化代谢产物。将标准品、质控品和样本加入至预包被高特异性鼠25(OH)D单克隆抗体的微孔板的微孔中，再加入生物素标记的25(OH)D抗原室温下孵育30分钟，之后冲洗。加入辣根过氧化物酶标记的抗生物素蛋白，选择地与生物素结合，接着冲洗，再利用底物显色。终止反应后，在酶标仪下450nm处读取吸光度，25(OH)D浓度与颜色强度成反比。

上述25羟基纤维素D检测试剂盒与目前通常使用的同类检测试剂盒相比，可提高工作效率，并大幅节约成本。本发明采用单克隆抗体包被板条，灵敏度约为5nmol/L，线性范围大于同类试剂盒，精密度和准确度均在试剂盒要求范围内，并且血清样本不需要稀释即可直接加样，操作方法比同类试剂盒简单，一般技术人员即可操作，操作时间比同类试剂盒减少一半。且无污染，可以作为同类放射性免疫分析试剂盒的替代产品。

附图说明

图1是本实用新型实施例1所述盒体与下凹瓶位的的结构示意图；

图2是本实用新型实施例1所述微孔板的结构示意图；

附图标记：1、盒体；2、下凹瓶位；3、框架；4、微孔板；5、微孔。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例来详细说明本实用新型。

实施例1

请参考图1-3，所述25羟基维生素D检测试剂盒的盒体1内具有固定泡沫模具形成的下凹瓶位2(共有14个下凹瓶位)，下凹瓶位2用于放置装有溶液的试剂瓶；位于塑料框架3中的微孔板4，微孔板4中的微孔5内包被有包被量为0.2μg的高特异性鼠25羟基维生素D单克隆抗体层。试剂瓶包括装有浓度为0.1μg/ml的生物素标记的25羟基维生素D的试剂瓶和装有工作浓度为1.0μg/ml的辣根过氧化酶标记的抗生物素蛋白的试剂瓶。

本实施例所述的25羟基维生素D检测试剂盒的主要组成成份如下：