[实用新型]一种胃蛋白酶原Ⅰ时间分辨荧光免疫检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及定量检测血清（血浆）中胃蛋白酶原Ⅰ含量的时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）试剂盒，属于体外试剂诊断技术领域。 

背景技术

胃蛋白酶原Ⅰ（简称PGⅠ）由胃底腺的主细胞、颈黏液细胞分泌，大部分进入胃腔，少量进入血液循环，而胃是PGⅠ的唯一来源，因此水平的变化可以反映胃粘膜状态和细胞数量的改变。 

国内外临床研究指出，PGⅠ升高，提示胃黏膜破损可能性高，患胃溃疡、胃炎的风险增加；PGⅠ降低，则患有萎缩性胃炎的可能性明显增加，甚至有患胃癌的风险。测定PGⅠ含量有助检测出胃溃疡、萎缩性胃炎、胃炎、胃癌等其他消化道疾病，供临床检测和体检筛查需求。国内外学者对胃癌患者的血清PG变化作了大量研究指出：胃癌患者的血清PG含量急剧降低，低分化癌患者PGⅠ含量更低于分化较高的胃癌患者；有数据显示，在被确诊的胃癌患者中，检测他们几年前的血样品可以发现，1/3的患者在当时还健康的情况下血清PG水平已经降低；PGⅠ与PGⅠ/PGⅡ比值并联使用灵敏度高，可有效应用于胃癌高发区人群的初步筛查。因此，PG检测被称为胃部的“血清学活检”，作为非侵入性方法，降低患者痛苦，简便、经济，具有普查价值。 

采用时间分辨荧光测量技术，以稀土离子为示踪材料，组建的PGI的TRFIA试剂盒具有测量灵敏度高、操作简便、示踪物稳定、定量分析量程宽、无放射性污染等优点，是目前PGI检测方法中最灵敏、测量范围最宽的方法之一，非常有利于大规模的普查筛选及患者病程检测。 

实用新型内容

本实用新型的目的是提供出一种新型的PGⅠ的时间分辨荧光免疫检测试剂盒，运用稀土离子的荧光放大效应，，达到灵敏度高、特异性好、量程范围宽的目的。该试剂盒能够实现快速、简便的检测。 

本实用新型的技术方案：一种胃蛋白酶原Ⅰ时间分辨荧光免疫检测试剂盒，该试剂盒的盒体（7）内设有：包被有PGⅠ单克隆抗体的微孔板，即抗体反应板1块（1），PGⅠ标准品6瓶（2），Eu标抗PGⅠ单克隆抗体（3），缓冲液1瓶（4），增强液1瓶（5），浓缩洗板液1瓶（6）。 

抗体反应板1块（1）放置于盒体（7）内的右前部，PGⅠ标准品6瓶（2）放置于盒体（7）内的右后部，为6只竖放的相邻放置的小瓶；盒体（7）内的左后部放置1只竖放的Eu标抗PGⅠ单克隆抗体（3）小瓶，盒体（7）内的左 前部从前向后依次放置横向的缓冲液1瓶（4）、浓缩洗板液1瓶（6）、增强液1瓶（5），此种放置方式使试剂盒体积紧凑，并使用方便。 

抗体反应板（1）为抗PGⅠ单克隆抗体包被，可拆卸96孔板；Eu标记的PGⅠ单克隆抗体（3）为另一株与包被抗体成对的抗PGⅠ单克隆抗体；PGⅠ标准品（2）为不同浓度的PGⅠ抗原冻干品一套。 

另附操作说明书。每个试剂盒的试剂足够96次测定，检测时包被抗体与Eu标记另一株抗体与样本中的抗原构成夹心复合物，加入增强液后，样品荧光计数与样品PGⅠ含量成正相关，根据标准曲线即获得相应PGⅠ浓度，操作简便。 

本实用新型的有益效果：一、灵敏度高，可达0.05ng/mL；二、量程宽，血清（浆）样本不需要稀释，样品浓度值介于0-300ng/mL的都能准确检测；三、检测时间短，2小时完成。 

附图说明

图1本实用新型的结构示意图。图中：1、包被有PGI单克隆抗体的微孔板，即抗体反应板1块（96T）；2、PGI标准品（0-300ng/mL，6瓶）；3、Eu标抗PGⅠ单克隆抗体（另一株，与包被抗体成对）1×0.5mL/瓶（用时1︰50稀释）；4、缓冲液：一瓶，50mL；5、增强液：一瓶，30mL；6、浓缩洗板液：一瓶，40mL；7、盒体。 

具体实施方式

实施例1：PGI的TRFIA样品测定 

（1）试剂的准备 

a、冻干品：使用前将冻干品平衡至室温，用1mL蒸馏水溶解。 

b、将所需数量的抗体反应板条使用前平衡至室温。 

c、洗涤液：将浓缩洗板液用蒸馏水1︰25倍稀释，作为工作洗涤液。 

d、Eu-标抗PGⅠ单克隆抗体的稀释：在应用前1小时内根据样品量以缓冲液1︰50倍稀释。 

（2）试验步骤 

a、取抗体反应板，从第一孔开始，每孔依次加入50μL的标准品（共6个标准点，建议做复孔以保证标准曲线的可靠性）。在标准品后依次加入50μL样品（建议采用双孔测量）。