[实用新型]一种检测水产品中呋喃它酮代谢物的胶体金试剂板

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种检测水产品中呋喃它酮代谢物的胶体金试剂板，具体涉及一种检测呋它酮代谢物的免疫胶体金快速检测试剂板。

背景技术

呋喃它酮是一种硝基呋喃类药物，具有非常好的抗菌作用，在临床上主要用于鸡白痢、鸡大肠杆菌病、鸡球虫病等各种肠道感染性疾病的治疗及用作猪、禽类和水产促生长的添加剂。但有关研究证明，呋喃它酮及其代谢物具有相当大的毒性和副作用，能诱导有机体基因突变及致畸胎，且能诱发癌症。欧盟早在1990年就颁布2377/90/EEC条例，将硝基呋喃类药物及其代谢物列为A类禁用药，规定其在动物源性食品中的最高残留量为1.0μg/kg。1995年起欧盟、日本、美国等开始禁止这类抗菌剂在食用的畜禽及水产动物中使用，并严格执行对输入的食用鱼、虾及禽类进行残留检测。中国农业部2002年2月发布‘食品动物禁用的兽药及其他化合物清单》中，明文禁止在所有食品动物的所有用途中使用硝基呋喃类药物。但是，由于其价格便宜，药效好，在很多国家还在继续违规使用。为了保障人民健康及扩大与世界各国动物源性食品贸易往来，必须对动物源性食品中呋喃它酮进行检测.由于呋喃它酮在体内很快就能被代谢，而在组织中结合的代谢产物(AMOZ)则能存留较长的一段时间，所以药残监测部门经常以检测其代谢产物一AMOZ为手段达到检测呋喃它酮残留的目的。

目前，呋喃它酮代谢物(AMOZ)检测方法主要有微生物法、色谱法、免疫分析法等。微生物法是测定抗生素残留的经典方法，具有前处理简单、经济、批量大等优点，但精确度、准确度和特异性不高。色谱法应用较普遍，精确度和灵敏度高，但因其流程繁琐、设备昂贵、检测速度慢等原因，很难实现现场检测和普及推广。酶联免疫检测法的基础是抗原抗体反应，该法精确、灵敏，检测时间大大缩短，但是ELISA法中酶的活性易受反应条件影响，由此易造成测定结果重复性较差。此外ELISA试剂寿命短，因此需要低温保藏。

基于抗原抗体特异性反应建立起来的免疫学测定方法灵敏度较高，特异性强，试样预处理简单，分析时间短，使用方便。因此，在现场监控和基层的大规模筛选检测中，免疫学检测方法更实际。

胶体金免疫层析法是在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术，除了具备酶联免疫法的诸多优点外，还克服了酶联免疫法的一些不足。该方法将反应所需要的原料的全部或大部分均已整合到试剂中，反应通常只需数分钟，测试结果以肉眼可见的显色条带来判断。具有简便快速、操作简单、特异性强、不需要额外设备等优点。

实用新型内容

本实用新型针对检测需求，研制开发一种检测限符合要求，重现性好，检测时间短，适合现场快速检测，技术产品或仪器设备成本较低，运行费用低的快速检测试剂。

本实用新型试剂板应用层析式抗体免疫竞争原理，通过抗原和金标抗体反应显色，特异性检测水产样品中的呋喃它酮代谢物残留水平。检测样品包括鱼、虾等水产品。如果样品溶液中含有呋喃它酮代谢物残留，呋喃它酮代谢物先和胶体金颗粒上的抗体反应，因此当胶体金颗粒随样品溶液扩散至检测线时，胶体金颗粒上抗体的活性位点因被样品溶液中的呋喃它酮代谢物药物占据而无法与检测线上呋喃它酮代谢物特异性抗原结合；当样品中的呋喃它酮代谢物含量超过试剂板检出限时，试剂板上的检测线显色较控制线浅甚至无显色，判定为阳性。反之，当样品中呋喃它酮代谢物含量在试剂板检出限以下或无残留时，试剂板上的检测线显色与控制线相近或偏深，判定为阴性。

本实用新型试剂板由上下两块塑料模板和背衬组成，背衬上依次紧密粘贴着样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫。相邻各部分间有1-2mm的重叠以保证层析作用从样品垫到吸水垫部位的顺利进行。

胶体金结合垫上包被有抗呋喃它酮代谢物单克隆抗体与胶体金的结合物；硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次包被有呋喃它酮代谢物-载体蛋白偶联物和羊抗鼠IgG，分别作为检测线和控制线。偶联呋喃它酮代谢物的载体蛋白可为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白等。

本实用新型试剂板的各部分组成成分和功能如下：

塑料模板，起固定背衬和标示各功能区(加样孔、检测区、控制区)的作用。

背衬，由一面涂有不干胶的不吸水韧性材料制成，起固定支撑试剂板其他组成部分的作用。

样品垫，由玻璃纤维制成，起吸收样品溶液和缓冲样品溶液pH值的作用。

胶体金结合垫，由聚酯膜制成，其上有抗呋喃它酮代谢物单克隆抗体与胶体金颗粒的结合物，为样品溶液中有效成分和金标抗体反应提供场所。