[实用新型]华法林个性化用药基因测序试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种检测基因的单核苷酸多态性（SNP）的试剂盒，具体涉及一种华法林个性化用药基因测序试剂盒。

背景技术

华法林是临床应用最广泛的口服抗凝药物，主要用于深静脉血栓形成、肺栓塞、房颤、心脏瓣膜置换术后等抗凝治疗。华法林个体差异大、治疗窗口窄，因而调整或确定华法林剂量、避免出血等不良反应的发生一直是临床上抗凝治疗管理的重点和难点。研究发现，患者由于抗凝过量所导致的致命性出血的发生几率为4.4～9.3%，而且随着抗凝强度的增大由此产生并发症的概率也会随着增高。目前主要靠监测患者的国际标准化比值(INR)来调整用药剂量。随着遗传药理学的发展，人们发现编码华法林的靶酶 VKORC1 和代谢酶 CYP2C9的基因遗传多态性是影响华法林用药剂量差异性的主要因素，而且在很大程度上解释了华法林的个体差异和种族差异。以遗传药理为基础的药物剂量调整得到各方面的重视，美国FDA建议华法林在用药前应做相关基因型检测，从而可以做到个性化给药。

华法林有两种构象：R和S。其中S–华法林的作用占60-70％，而R–华法林只有30-40％。S–华法林主要由CYP2C9代谢生成无活性的代谢产物。影响华法林用药量的位点有很多，如CYP2C9，VKORC1等，CYP2C9的基因多态性与华法林剂量间的关系早已被证实。亚洲人种常见的突变型为CYP2C9*3。CYP2C9*3突变导致CYP2C9酶活性降低，其活性仅为野生型的5％，突变均降低了酶活性，使其底物的清除率降低，血药浓度升高，因此，需降低用药剂量，以防止不良反应的发生。CYP2C9可以解释20％的华法林剂量；维生素K环氧化物还原酶(VKOR)是华法林作用的靶点，也是维生素K依赖性凝血因子生成的限速酶，目前已有一系列VKORC1的单核苷酸多态性与华法林剂量的相关性报道。VKORC1激活VKORC，突变型的启动子活性高，VKORC的活性变高，凝血作用高，华法林的用量变大。VKORC13673GG剂量较高，而GA，AA剂量依次降低。VKORC1基因多态性是影响华法林用药剂量个体差异和种族差异的主要因素。VKORC1可以解释30％的华法林剂量。

目前，基于华法林个体用药的差异及用药过多或是过少出现的的出血、血栓等危险现象，现在很多医疗机构也开始对患者进行华法林用药前做相关的基因检测，以下是一些相关基因检测试剂盒的专利，但存在或检测位点不全面，或使用不方便等的问题。

发明内容

本实用新型所要解决的技术问题是提供一种使用方便，检测全面准确，方便保存运输，成本相对较低的华法林个性化用药基因测序试剂盒。

为解决上述技术问题，本实用新型所采用的技术方案为：

华法林个性化用药基因测序试剂盒，包括盒体、衬垫，所述的衬垫设于盒体内，所述衬垫上横向或纵向排布有与检测位点个数相应的数组样品孔，每组样品孔中样品孔的个数至少为三个，分别放置封装有与检测位点相对应的PCR扩增正向引物、PCR扩增反向引物、测序引物的样品管；所述的衬垫中还布设有2个样品孔，分别放置封装有Taq 酶、PCR反应液的样品管。

按上述方案，所述衬垫上横向或纵向布设有三组样品孔，分别与三个检测位点相对应，所述放置封装有Taq 酶、PCR反应液的样品管的两个样品孔分别设于第一组和第二组样品孔之间、第二组和第三组样品孔之间。

本实用新型的有益效果：

（1）本试剂盒通过横向或纵向排布与检测位点个数相对应的多组样品孔，在各组样品孔中间至少布设三个样品孔，分别放置与检测位点相对应的PCR扩增正向引物、PCR扩增反向引物、测序引物，方便使用者获取及测定完成后进行有序相应放回，使用方便；

（2）本试剂盒还另外设有设有2个样品孔，分别封装有Taq 酶、PCR反应液的样品管，可大大方便使用者的使用，提高检测效率；

（3）本试剂盒中的测序引物和PCR扩增引物以冻干粉的形式储存于样品管内，方便保存和运输，降低成本。

附图说明

图 1 为本实用新型实施例1的华法林个性化用药基因测序试剂盒的结构示意图。图中1 盒体；2 衬垫；3 样品孔组；4 样品孔。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本实用新型的发明内容进行进一步地说明。

实施例 1