[实用新型]一种检测乳品中氟喹诺酮类药物的免疫胶体金试剂板

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种检测乳品中氟喹诺酮类药物的免疫胶体金试剂板，具体涉及一种检测乳品中氟喹诺酮类药物的免疫胶体金快速检测试剂板。

背景技术

牛奶及其制品是人尤其是婴幼儿的主要营养食品，但残留抗生素的牛奶会严重危害饮用者的身体健康。近年来，由于经济利益的驱动，不合理地使用和滥用饲料添加剂的情况经常发生，造成抗生素在动物组织中的残留，并通过食物链进入人体，已经对人类的健康构成了严重的威胁。牛奶中的抗生素残留会导致人体内产生耐药性菌株，造成人体内的菌群失调，使人的免疫力降低，严重时可危及病人生命。另外，残留抗生素会影响奶制品品质，降低产量和质量，给生产者造成巨大的经济损失。

氟喹诺酮类(FQNs)又称吡啶酮酸类药物，是一类人工合成的广谱抗菌药，是近20年来迅速发展起来的一类十分重要的广谱抗生素。FQNs药物具有抗菌谱广、抗菌作用强、体内分布广泛、组织药物浓度高、蛋白结合率低、使用方便、不良反应小及价格低廉等特点，已成为兽医临诊中最重要的抗感染药物之一，被大量用于治疗、预防和促生长。由于潜在耐药性和致癌性，其残留问题已引起世界各国的广泛关注。美国禁止在食用动物养殖中使用氟喹诺酮类药物；我国以及世界卫生组织、欧盟、日本等国家和组织都将氟喹诺酮类药物列入限制使用的兽药名单中，并制订出相应的最高残留限量，牛奶中氟喹诺酮类药物的最高残留限量在20～100μg/L之间。

因此，开展对牛奶中氟喹诺酮类药物残留的检测方法研究，实施对氟喹诺酮类药物残留的监控，已是当务之急。

目前国内外有关氟喹诺酮类药物的检测方法，主要有微生物法、色谱法、免疫分析法等。但色谱法，如高效液相色谱法(HPLC)，需要昂贵、复杂的仪器设备，且操作过程繁琐，不符合市场监控、快速、简便、价廉的要求。

免疫分析法是将抗原抗体反应与灵敏的检测系统结合而成的一种简便、快速、敏感的分析方法，一般不需要昂贵的仪器、前处理简化、灵敏、特异性强、快速，越来越多地被用于食品中药物等残留的检测。目前，应用广泛的免疫分析方法主要是酶联免疫吸附法和胶体金免疫层析法。

酶联免疫吸附法是应用抗原抗体特异性反应和酶的高效催化作用来测定药物含量的免疫分析方法，具有特异性强、灵敏度高、快速、简便等优点。但是ELISA法中酶的活性易受反应条件影响，由此易造成测定结果重复性较差。而且需要用到昂贵的特殊仪器设备，具有一定的局限性。

胶体金免疫层析法是在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术。该方法将反应所需要的原料的全部或大部分均已整合到试剂中，反应通常只需数分钟，测试结果以肉眼可见的显色条带来判断。具有简便快速、操作简单、特异性强、不需要额外设备等优点。

实用新型内容

本实用新型针对检测需求，研制开发一种检测限符合要求，重现性好，检测时间短，适合现场快速检测，技术产品或仪器设备成本较低，运行费用低的快速检测试剂。

本实用新型试剂板应用层析式抗体免疫竞争原理，通过抗原和金标抗体反应显色，特异性检测牛奶中的氟喹诺酮类药物残留水平。如果样品溶液中含有氟喹诺酮类药物残留，氟喹诺酮类药物先和胶体金颗粒上的抗体反应，因此当胶体金颗粒随样品溶液扩散至检测线时，胶体金颗粒上抗体的活性位点因被样品溶液中的氟喹诺酮类药物药物占据而无法与检测线上氟喹诺酮类药物特异性抗原结合；当样品中的氟喹诺酮类药物含量超过试剂板检出限时，试剂板上的检测线显色比控制线浅或无显色，判定为阳性。反之，当样品中氟喹诺酮类药物含量在试剂板检出限以下或无残留时，试剂板上的检测线显色比控制线深或一样深，判定为阴性。

本实用新型试剂板由上下两块塑料模板和背衬组成，背衬上依次紧密粘贴着样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫。相邻各部分间有1-2mm的重叠以保证层析作用从样品垫到吸水垫部位的顺利进行。

胶体金结合垫上包被有抗氟喹诺酮类药物单克隆抗体与胶体金的结合物；硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次包被有氟喹诺酮类药物-载体蛋白偶联物和羊抗鼠IgG，分别作为检测线和控制线。偶联氟喹诺酮类药物的载体蛋白可为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白等。

本实用新型试剂板的各部分组成成分和功能如下：

塑料模板，起固定背衬和标示各功能区(加样孔、检测区、控制区)的作用。

背衬，由一面涂有不干胶的不吸水韧性材料制成，起固定支撑试剂板其他组成部分的作用。

样品垫，由玻璃纤维制成，起吸收样品溶液和缓冲样品溶液pH值的作用。