[实用新型]一种检测乳品中磺胺类药物的免疫胶体金试剂板

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种检测乳品中磺胺类药物的免疫胶体金试剂板，具体涉及一种检测乳品中磺胺类药物的免疫胶体金快速检测试剂板。 

背景技术

磺胺类药物(Sulfonamids，SAs)是指具有对氨基苯磺酰胺结构的一类药物的总称，包括磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺甲基异恶唑、磺胺喹恶啉等药物。其通过干扰细菌的酶系统对邻氨基苯甲酸的利用而发挥抗菌作用。由于此类药物抗菌谱广，价格低廉，是兽医临床和畜牧养殖业中最常用的药物添加剂之一。已广泛用于预防和治疗乳牛传染病，以提高奶牛的抗病能力和预防病毒性疾病引起的继发性感染。由于SAs在体内作用和代谢的时间比较长，容易在体内产生磺胺结晶，从而对肾脏造成损害。同时，SAs药物还会引起过敏反应和造血功能紊乱，并且长期小剂量使用SAs容易诱导菌株产生耐药性。因此，世界上各个国家都对动物源性食品中的磺胺类药物残留限量作出了越来越科学、严格的规定。我国农业部2002年12月发布的《动物性食品中兽药最高残留限量》和香港特别行政区《药物、化学物及其最高残留限量》中均规定牛奶中磺胺类药物的最高残留限量为100μg/L。美国规定牛奶中磺胺类药物的最高残留限量为10μg/L。 

目前，国内外已经报道的、针对磺胺类药物及其代谢物残留的分析方法，主要有酶联免疫吸附法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、液相色谱一质谱法等。这些方法虽然灵敏度高，但需要特殊的仪器，成本高、耗时，不适于大量样本的现场筛选。 

随着公众对食品安全越来越关注，牛奶中的药物残留问题也越来越得到重视。由于在奶牛饲养中不合理的使用药物，会导致牛奶中的药物残留，影响食品的安全性，并有可能污染环境。因此，研究牛奶中磺胺类药物残留的快速检测方法，对牛奶中磺胺类药物残留实施监控是必要的。 

免疫分析法是将抗原抗体反应与灵敏的检测系统结合而成的一种简便、快速、敏感的分析方法，一般不需要昂贵的仪器、前处理简化、灵敏、特异性强、快速，越来越多地被用于食品中药物等残留的检测。目前，应用广泛的免疫分析方法主要是酶联免疫吸附法和胶体金免疫层析法。 

酶联免疫吸附法，由于酶的活性易受反应条件影响，且需要用到昂贵的特殊仪器设备，因而，具有一定的局限性。 

胶体金免疫层析法是在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术。该方法将反应所需要的原料的全部或大部分均已整合到试剂中，反应通常只需数分钟，测试结果以肉眼可见的显色条带来判断。具有简便快速、操作简单、特异性强、不需要额外设备等优点。 

实用新型内容

为了克服现有磺胺类药物残留检测分析方法需配备昂贵的特殊仪器设备，检测时间长，成本高，不适于大量样本的现场快速筛检的缺陷。本实用新型针对检测需求，研制开发了一种检测乳品中磺胺类药物的免疫胶体金试剂板，该试剂板检测限符合要求，重现性好，检测时间短，适合现场快速检测，而且所需仪器设备成本较低。 

本实用新型试剂板应用层析式抗体免疫竞争原理，通过抗原和金标抗体反应显色，特异性检测牛奶中的磺胺类药物残留水平。如果样品溶液中含有磺胺类药物残留，磺胺类药物先和胶体金颗粒上的抗体反应，因此当胶体金颗粒随样品溶液扩散至检测线时，胶体金颗粒上抗体的活性位点因被样品溶液中的磺胺类药物药物占据而无法与检测线上磺胺类药物特异性抗原结合；当样品中的磺胺类药物含量超过试剂板检出限时，试剂板上的检测线显色比控制线浅或无显色，判定为阳性。反之，当样品中磺胺类药物含量在试剂板检出限以下或无残留时，试剂板上的检测线显色比控制线深或一样深，判定为阴性。 

本实用新型试剂板由上下两块塑料模板和背衬组成，背衬上依次紧密粘贴着样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫。相邻各部分间有1-2mm的重叠以保证层析作用从样品垫到吸水垫部位的顺利进行。 

胶体金结合垫上包被有抗磺胺类药物单克隆抗体与胶体金的结合物；硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次包被有磺胺类药物-载体蛋白偶联物和羊抗鼠IgG，分别作为检测线和控制线。偶联磺胺类药物的载体蛋白可为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白等。 

本实用新型试剂板的各部分组成成分和功能如下： 

塑料模板，起固定背衬和标示各功能区(加样孔、检测区、控制区)的作用。 

背衬，由一面涂有不干胶的不吸水韧性材料制成，起固定支撑试剂板其他组成部分的作用。 

样品垫，由玻璃纤维制成，起吸收样品溶液和缓冲样品溶液pH值的作用。 

胶体金结合垫，由聚酯膜制成，其上有抗磺胺类药物单克隆抗体与胶体金颗粒的结合物，为样品溶液中有效成分和金标抗体反应提供场所。