[实用新型]检测赭曲霉毒素A含量的ELISA试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及检测药物含量的试剂盒，特别是检测饲料中赭曲霉毒素A含量的酶联免疫检测（ELISA）试剂盒，ELISA（Enzyme Linked Immunosorbnent Assay）是酶联免疫吸附剂测定的简称，它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种酶免技术。 

背景技术

赭曲霉毒素A（Ochratoxin A）由曲霉和青霉两类霉菌产生，常污染食品和饲料。赭曲霉毒素A能引起动物急性和慢性毒性，是强致癌物质，可对肾脏造成不可逆的致死毒害，引起肾脏萎缩，还可使胎儿畸形、流产甚至死亡，严重影响动物的机能和生长状况，其对人类的潜在危害备受关注。为此，国际癌症研究机构JARC将其定位ⅡB类致癌物，加强对赭曲霉毒素A检测是防止被赭曲霉毒素A污染食物和饲料直接或间接进入人类食物链重要方法。 

目前，赭曲霉毒素A的残留分析方法主要有化学分析法和免疫化学分析法，化学分析法最早应用于毒素的残留检测，在1973年薄层层析法即成为国际化学分析协会(ACAC)检测赭曲霉毒素A的官方方法，薄层层析法的优点是方法简单，使用的试剂价格便宜，但是存在灵敏度较差，所需试剂繁多，检测周期长，仪器检测，如液相-质谱联用法具有灵敏度高等特点，但是设别昂贵，需要复杂的样品前处理，不适合现场监控和大量样本的筛查。 

实用新型内容

本实用新型所要解决的问题是提供一种小巧轻便的赭曲霉毒素A残留检测试剂盒，其操作简便，检测快速、准确、灵敏度高，成本低，稳定性好，可同时进行多个样品中赭曲霉毒素A含量的检测，减少了检测样本所需要的时间。 

本实用新型的技术方案是：一种检测赭曲霉毒素A含量的ELISA试剂盒，包括盒体和盒内的一块96孔的酶标板、一张盖板膜、11瓶试剂和放试剂的下凹瓶位、一个自封袋，其特征在于：酶标板是采用96孔试剂板作为固相载体，在试剂盒微孔条上预包被赭曲霉毒素A偶联抗原制成的检测板，11瓶试剂分别为6瓶标准品溶液、浓缩酶结合物、酶结合物稀释液、底物液A液、底物液B液、终止液。  

试剂盒盒体是硬纸盒；96孔的聚苯乙烯酶标板，放于真空铝箔袋内；盖板膜是塑料硬膜； 标准品溶液均用白色帽的白色塑料瓶，浓缩酶结合物用红色帽的白色PE塑料瓶，酶结合物稀释液用绿色帽的白色PE塑料瓶，底物液A液用白色帽的白色PE塑料瓶，底物液B液用红色帽的黑色PE塑料瓶，终止液用黄色帽的白色PE塑料瓶，下凹瓶位由塑料泡沫制成。 

酶标板是由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成，每个可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔，每个反应孔预包被赭曲霉毒素A偶联抗原；盖板膜大小与酶标板横切面大小一致；标准品溶液6瓶，1ml/瓶；浓缩酶结合物1瓶，0.7ml；酶结合物稀释液1瓶，14ml；底物液A液1瓶，7ml；底物液B液1瓶，7ml；终止液1瓶，7ml。 

试剂用不同大小、不同颜色的塑料瓶盛装并固定在泡沫塑料模具中与酶标板、盖板膜、自封袋一同封装在硬纸盒内，以便于携带和运输。 

每一个试剂盒中的试剂足够进行96次测定（包括标准分析孔），既可进行一次连续多个样品的检测，也可以将板孔拆开多次检测。将剩下的放回铝箔袋中用自封袋密封，这样可以保证试剂盒检测结果的准确性。检测时，样本中的赭曲霉毒素A将和酶标板微孔条上预包被偶联抗原竞争赭曲霉毒素A的酶结合物，用TMB底物显色，样本吸光度值与样本中赭曲霉毒素A的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样本中赭曲霉毒素A含量，其操作简便易行。 

经实验表明本试剂盒检测饲料（原料、配合料和浓缩料）样本中赭曲霉毒素A残留，具有很高的灵敏度（1μg/L），样本的最低检测限为10μg/kg，回收率为90%±20%。本试剂盒所需仪器较少，只需要酶标仪、均质器、振荡器、离心机、微量加样器等，同类实验室一般均有配备，所需成本较低。 

本实用新型的有益效果是：能快速、简便、准确地用于赭曲霉毒素A含量的检测。 

附图说明

图1为本实用新型酶标板的侧面纵剖面图（长为8.55cm）； 

图2为本实用新型酶标板的侧面横剖面图（长为12.8cm）； 

图3为本实用新型酶标板的俯视图； 

图4为本实用新型盖板膜平面图； 

图5为本实用新型试剂瓶纵剖面平面图； 

图6为本实用新型固定泡沫模具俯视图； 

图7为本实用新型盒体与固定泡沫模具侧视图。 

具体实施方式