[实用新型]胶体金免疫层析法疟疾抗原联检试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及检测试剂盒技术领域，具体涉及联检试剂盒技术领域，特别涉及一种胶体金免疫层析法疟疾抗原联检试剂盒。 

背景技术

疟疾是严重危害人类健康的虫媒传染病，如果不能及时诊断和治疗，常常会引起病人的死亡，同时也引起疾病的进一步传播。快速而准确地检测疟原虫是有效防治疟疾的关键。到目前为止，对可疑病人采血制作厚薄血片经染色后显微镜检查法（简称镜检法）一直被认为是疟疾诊断的“金标准”，其优点是费用低、能鉴定疟原虫虫种；但是也存在着缺陷，即需要非常专业的检验人员，当原虫密度较低时，可出现假阴性，引起误诊或漏诊，同时还需要显微镜、染色液等一些辅助设备。随着临床机构，特别是一些现代化程度越高的医院，由于检验人员更依赖仪器设备，对镜检能力的掌握程度明显下降；而在一些欠发达地区，由于种种原因，未能配备镜检的相关设备和试剂。这些因素限制了临床对疟疾快速有效的诊断。 

疟疾快速诊断试验（RDT）是一种能快速且简便地对患者血液中的疟原虫进行检测的诊断技术，它通过在基体上包被抗体以检测患者样本的抗原，通过标记跟踪物的第二抗体使原来的抗原抗体复合物显示出来。RDT改变了过去疟疾的诊断依赖临床基础或显微镜技术，对那些缺乏显微镜和染色试剂、镜检能力较差的地区这一特性更加明显。该法操作简便，非专业人员按照说明书即可进行操作，15分钟内通过肉眼就能观察结果，结果易于判断，实验过程不需电源和仪器，因此适于现场和基层人员使用。 

目前，用于疟疾免疫层析快速诊断检测的特异性靶抗原主要有3种：富组氨酸蛋白II（HRP-II）、乳酸脱氢酶（pLDH）和醛缩酶（ALD）。 

（1）HRP-II是恶性疟原虫消化血红蛋白后形成的代谢产物，由血液期无性体和早期配子体合成，含有大量组氨酸，具有种特异性，由于是水溶性抗原其可在疟疾患者的血浆、尿、全血中检测到，是诊断恶性疟的理想靶抗原。 

（2）pLDH是疟原虫体内代谢酶，红内期疟原虫无性期和配子体期均有表达，其物理生化、免疫学特征、酶催化作用等与人体红细胞和其他许多微生物的乳酸脱氢酶（LDH）差异性大，疟原虫LDH具有种属特异性，可作为免疫诊断的靶抗原。 

（3）ALD是间日疟原虫特有的抗原，从而诊断样本是否感染间日疟原虫。 

由于镜检法这些的缺陷和RDT优势，使得世界卫生组织（WHO）十分重视和支持RDT的发展。在过去的几年，全球多个企业研发并批量生产出了多个RDT的产品，使得全球使用RDT的数量和使用范围都有了快速的增长。为了有效评估不同厂家所研发和生产RDT的敏感性、特异性等相关指标，为各个国家疟疾控制项目在采购RDT和实施何种防治措施提供依据，WHO、热带病研究和培训特别规划署（TDR）、创新诊断学基金会（FIND）于2008、2009和2011年全球生产的RDT产品进行了3轮测试。在95个接受完全测试且不重复的产品中，29个为只检测恶性疟；57个为检测和鉴别恶性疟和非恶性疟（属特异性或种特异性）；8个为检测恶性疟和非恶性疟，但不做鉴别诊断；只有1个产品是只检测间日疟的。在WHO测试的近百个产品中，来自中国的产品只有1个。 

WHO对RDT产品的测试结果显示，在检测高原虫密度（2000或5000个/μl）样本时，大多数产品都有很高的检出率，但在检测低原虫密度（<200个/μl）样本时，各个产品检测的结果差异很大。从几种不同的靶抗原的比较来看，检测恶性疟原虫富组氨酸蛋白2（HRP-2）抗原的试验显示了最高的检出率，但是，也有一些检测乳酸脱氢酶（pLDH）的试验检出率很高，而检测醛缩酶（ALD）抗原的产品总体上都不尽人意。 

从WHO的检测结果来看，目前RDT产品的主要不足是对于低原虫密度的检测灵敏度不高，和检测相同抗原的不同产品之间的敏感性和特异性差异极大（从0～100％），提示不同产品使用的检测抗体的质量差异也较大。疟疾检测试剂的性能除了本身的质量以外，还受疟疾的传播和疾病流行区当地条件的多种因素影响，如疟原虫的种类、靶抗原的变异性、人群的感染强度（原虫密度）和气候等。因此，有针对性的开发适合特定区域的目标人群的检测试剂是疟疾抗原检测产品的发展方向。 

实用新型内容

本实用新型的目的是克服了上述现有技术中的缺点，提供一种胶体金免疫层析法疟疾抗原联检试剂盒，该胶体金免疫层析法疟疾抗原联检试剂盒可以通过一次取样同时检测间日疟和恶性疟，应用简便，联检结果为下一步准确治疗提供了有力依据，适于大规模推广应用。