[实用新型]呋喃妥因代谢物检测试剂盒有效
申请号: | 201220552158.6 | 申请日: | 2012-10-25 |
公开(公告)号: | CN202903799U | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 何方洋;余厚美;刘福林;蒲小容;何丽霞;王建霞;段盈盈 | 申请(专利权)人: | 北京勤邦生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577 |
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地址: | 102206 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 呋喃 代谢物 检测 试剂盒 | ||
(一)技术领域:本实用新型涉及一种呋喃妥因代谢物检测试剂盒,特别是检测动物源性食品中呋喃妥因代谢物残留量的试剂盒。
(二)背景技术:硝基呋喃类药物因有非常好的抗菌作用和药动力学的特性,曾经被广泛应用,作为禽类、水产和猪促生长的添加剂。但在长时间的实验研究过程中发现,硝基呋喃类药物和代谢物均可以使实验动物发生癌变和基因突变,正因为如此才导致此类药物禁止在治疗和饲料中使用。呋喃妥因在1995年被禁用。
由于硝基呋喃类药物在体内很快就能被代谢,而在组织中结合的代谢产物则能存留较长的一段时间,所以在分析此类药物的残留时经常要分析其代谢后的产物,管理部门就以检测代谢产物为手段达到检测硝基呋喃类残留的目的。呋喃妥因代谢产物AHD;呋喃它酮代谢产物AMOZ;呋喃唑酮代谢产物AOZ;硝基糠腙(呋喃西林)代谢产物SEM。
用来检测呋喃妥因代谢物的最常用方法是LC-UV,LC-MS和LC-MS/MS。酶联免疫方法结合了色谱技术,采用AHD衍生物的特异性抗体,具有很高的精确度和灵敏度,较低的操作技术要求和短暂的检测时间,检测样本量大等特点在检测中很好的表现出来。
(三)实用新型内容:本实用新型提供一种小巧轻便的呋喃妥因代谢物检测试剂盒,其操作简便,检测灵敏度高,成本低,可进行一次连续进行多个样品中呋喃妥因代谢物残留量的测定,减少了检测样本所需要的时间。
呋喃妥因代谢物检测试剂盒,包括固相载体、放试剂的下凹瓶位、位于下凹瓶位上的试剂瓶,固相载体上设有微孔条,微孔条包括微孔、包被层;试剂瓶包括装有呋喃妥因代谢物单克隆抗体溶液的试剂瓶、装有辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠抗抗体的试剂瓶。
所述包被层由呋喃妥因代谢物偶联抗原组成。
所述试剂盒还包括6瓶装有呋喃妥因代谢物标准液的试剂瓶,2瓶装有底物显色液的试剂瓶,1瓶装有终止液的试剂瓶,1瓶装有洗涤液的试剂瓶,1瓶装有缓冲液的试剂瓶,1瓶装有衍生化试剂的试剂瓶。
所述固相载体由96孔聚苯乙烯试剂板组成。
每一个试剂盒中的试剂足够进行96次测定,既可进行一次连续多个样品的检测,也可以将板孔拆开多次检测。检测时,样本中的呋喃妥因代谢物将和微孔条包被层的呋喃妥因代谢物偶联抗原竞争呋喃妥因代谢物单克隆抗体,加入辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠抗抗体后,用底物显色液显色,样本吸光度值与样本中呋喃妥因代谢物的残留量成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中呋喃妥因代谢物残留量。
经实验表明本试剂盒具有很高的灵敏度:检测灵敏度为:0.1μg/L。相对于其他呋喃妥因代谢物检测方法,本试剂盒所需仪器较少,同类实验室一般均有配备,所需成本较低。
本实用新型的有益效果是:能快速、简便、灵敏、准确地用于动物源性食品中呋喃妥因代谢物残留量的检测。
(四)附图说明:
图1本实用新型试剂盒的固相载体一列微孔条图。
图2 本实用新型固相载体图。
图3 本实用新型盒体、下凹瓶位结构示意图;
(五)具体实施方式:
如图1至图3所示,呋喃妥因代谢物检测试剂盒,盒体1内具有固定模具形成的下凹瓶位2,下凹瓶位用于放置装有溶液的试剂瓶,96孔聚苯乙烯试剂板组成的固相载体3,固相载体的的微孔条4包括微孔5和包被层6,包被层由呋喃妥因代谢物偶联抗原组成,试剂瓶包括装有呋喃妥因代谢物单克隆抗体溶液的试剂瓶、装有辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠抗抗体的试剂瓶。
为了更有利于检测呋喃妥因代谢物残留的检测,试剂盒还可以包括有6瓶装有呋喃妥因代谢物标准液的试剂瓶,2瓶装有底物显色液的试剂瓶,1瓶装有终止液的试剂瓶,1瓶装有洗涤液的试剂瓶,1瓶装有缓冲液的试剂瓶,1瓶装有衍生化试剂的试剂瓶。
试剂盒的试剂瓶内的具体成分如下:
(1)呋喃妥因代谢物单克隆抗体工作液10ml /瓶;
(2)呋喃妥因代谢物标准品溶液1ml/瓶,浓度分别为0μg/L、0.1μg/L、0.3μg/L、0.9μg/L、2.7μg/L、8.1μg/L;
(3)辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠抗抗体工作液12ml/瓶;
(4)底物显色液,分别为底物显色A液,底物显色B液,底物显色液A液为过氧化脲7ml/瓶,底物显色液B液为四甲基联苯胺7ml/瓶;
(5)终止液7ml/瓶;
(6)缓冲液50ml/瓶,为pH值为7.2、0.2-0.5mol/L磷酸盐缓冲液。使用时2倍稀释。
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