[实用新型]一种用于密度梯度离心分离单个核细胞的血袋

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种血袋，尤其是涉及一种用于密度梯度离心分离单个核细胞的血袋。

背景技术

目前，科研院所和医院所用的血袋包括血袋本体，血袋本体上部装有数根封闭的短管，下部装有一根带针头的长管，针头带有一次性针头套，袋内一般装有28毫升的血液保存液，其含有枸橼酸、枸橼酸钠、葡萄糖、磷酸二氢钠、腺嘌呤等抗凝剂和血液营养剂，这种血袋主要用来储存血库中的血液和分离脐血干细胞等，保存血液的时间较长（约35天）。

但是，在众多科研院所和医院里取血，很多时候是为了在数小时内通过密度梯度离心的方法得到其中的单个核细胞，并进行进一步培养或分选。然而，现有的血袋存在以下缺陷：（1）分离单个核细胞后续耗材多，制作成本高，易污染：操作时，单个核细胞需要先将血液稀释一倍后用密度梯度离心法离心才能得到，以100ml血液为例，至少需要多用4根50ml离心管和2根移液管来稀释血液并添加血液到Ficoll液平面上；（2）不适用于内皮祖细胞的分离和培养，在脐血内皮祖细胞培养时，如果用现有血袋中的枸橼酸钠抗凝，得到的内皮祖细胞克隆不到肝素抗凝的十分之一；目前，试验中需要用到肝素抗凝的脐血只能在50ml离心管中自行加肝素，以100ml血液为例，需要多加6根50ml离心管和2根移液管才能完成实验；（3）取血易污染，现有血袋的注射针头套通常是一次性的，护士取血操作后通常针头套不能严密的套回去，极易造成污染；如果用离心管取血，护士操作繁琐且难度大，操作时，需要护士用注射器抽血再打到离心管中；（3）容量小，目前所用抽取脐血血袋大部分容积在200ml，除去抗凝剂所占的体积，只能抽取约150ml脐血，没有足够的容积容纳同体积的稀释液；如果用离心管，所取的血液通常少于40ml，远不能满足在实验室常见的CD34+的造血干细胞分选需要；（4）只有一个带针头的长管用于抽血，放血时则只能用碘酒消毒长管后剪去部分长管以防针头部位可能的污染和避免长管和针头的少量血凝块。

实用新型内容

本实用新型所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种操作方便简单，污染可能性低，容量大，使用过程耗材少的可用于密度梯度离心分离单个核细胞的血袋。

本实用新型解决其技术问题所采用的技术方案是，一种用于密度梯度离心分离单个核细胞的血袋，包括血袋本体，所述血袋本体上部设有一个供悬挂的圆孔，所述血袋容积为280ml-320ml，所述血袋本体上部连有两根均带橡皮封口和螺旋盖的短管，所述血袋本体下部连接有两根均带针头的长管，所述长管上设有流体流动速度控制阀，所述针头上设有可重复盖紧的针帽；还设有外包装袋，所述外包装袋比血袋本体长28cm-32c；外包装袋上设有撕裂口。

进一步，所述血袋本体容积优选300ml。

进一步，所述短管长度为1.5cm-2.5cm。

进一步，所述短管长度优选2cm。

进一步，所述长管长度为1cm-1.5cm。

进一步，所述长管长度优选1.2m。

进一步，所述外包装袋比血袋本体长的长度优选30cm。

进一步，外包装袋上的撕裂口距离封口8－10cm，以利于第二次热合封闭。

使用时，抽血前，在超净台中沿封口剪开外包装袋，取出血袋本体，先拧开一短管的螺旋盖，将肝素抗凝剂经短管橡皮封口注入真空血袋本体内，盖上螺旋盖，然后在超净台中将血袋的外包装套上重新热合封闭，并放入4℃下保存。

抽血时，撕开外包装袋，取出一长管，取下长管针头针帽，打开流体流动速度控制阀阀门，利用真空和重力的作用抽血，取血完毕后，关闭流体流动速度控制阀阀门，针帽套回针头上。

抽血后，将取有血液的血袋放入实验室超净台中，拧开另一短管螺旋盖，将与血量同体积的磷酸缓冲液（PBS）或培养基经短管橡皮封口用注射器注入血袋本体内稀释血液，然后拧紧短管螺旋盖，将血袋中的液体混匀，再将装有稀释血液血袋本体上部的圆孔挂在超净台顶部的钩子上，取下另一根长管针头针帽，调节好流体流动速度控制阀，缓慢将稀释后的血液从血袋本体内经长管从针头口滴出，并滴到装有Ficoll的离心管内的Ficoll液平面上。每管离心管加入稀释血液后，继续密度梯度离心分离单个核细胞的过程。