[实用新型]呋喃它酮代谢物荧光定量检测系统

说明书

技术领域

本实用新型属于医学检验领域，具体地说，本实用新型涉及一种呋喃它酮代谢物荧光定量检测系统，包括呋喃它酮代谢物荧光定量检测免疫层析检测试剂盒和荧光定量检测仪。 

背景技术

呋喃它酮属于硝基呋喃类药物中的一种，硝基呋喃类药物是一类化学合成的广谱抗菌药，主要包括呋喃它酮、呋喃唑酮、呋喃西林和呋喃妥因。该类药物5～10mg/kg即能抑制多种革兰氏阳性和阴性菌，20～50mg/kg有杀菌作用，对某些原虫、真菌亦有一定作用。主要作用于微生物酶系统，抑制乙酰辅酶A，干扰微生物糖类代谢，从而起到抑菌、杀菌的作用。其抗菌力不受血液、粪便、脓汁和组织分解产物影响，外用对组织刺激性小，细菌对本类药物亦较少产生耐药性。因而曾被广泛应用于治疗动物疾病，并且由于其具有促生长的功能，还曾被当做饲料添加剂使用。硝基呋喃类药物在动物体内代谢迅速，药物半衰期约5小时，呋喃它酮代谢物AMOZ，化学名称为5-甲基吗啉-3-氨基-2-恶唑烷酮，可与细胞膜蛋白紧密结合并长期稳定存在，以致药物在体内消除速度变慢，日常生活普通的食品加工方法，如微波加工、烹调等均难以使蛋白结合态的代谢物大量降解。而当含代谢物的食品被人类食用后，在胃液的酸性条件下这些代谢物就会从蛋白质中水解出来被人体吸收。然而，研究表明，大剂量或长时间应用硝基呋喃类药物均能对畜禽产生毒性作用，并且该类药物还具有致癌致畸致突变，呋喃它酮更是强致癌性药物。欧盟1990年颁布条例将硝基呋喃类药物及其代谢物列为A类禁用兽药，规定其在动物源性食品中的残留检测限为1.0ug/kg，1995年起禁止在食用性动物中使用该类药物，规定在动物源性食品中的检出限为不得检出。随后，美国和中国等国家也已明令禁止该类药物的使用。日本于2006年将硝基呋喃及其代谢物残留限量降为0.5ug/kg。近年来，我国出口产品频繁被查出硝基呋喃类药物残留，这不仅造成了严重的经济损失，也影响了我国的国际形象。以上事例都造成了严重的经济损失。要改变动物性食品安全的现状，首要提高人们对动物性食品安全性问题的认识，从理论和技术角度，建立适宜的兽药残留分析方法和制定残留标准是最基本的方面。 

目前用于检测动物源性食品中硝基呋喃类药物及其代谢物残留的主要方法有液相色谱-紫外检测器法(LC-UV)、高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)、高效液相色谱-质谱/质谱联用法(HPLC-MS/MS)，这些方法虽然具有准确可靠、重复性强等优点，但仪器昂贵、操作复杂、便携性差等不利于大范围的推广应用及高通量检测。因此，本专利建立一种简便、可靠、快速、灵敏检测AMOZ残留的检测方法，以便对动物组织中的AMOZ残留进行监控。 

申请号为CN 201020586590的发明专利，公开了一种检测水产品中呋喃它酮代谢物的ELISA检测试剂盒。该试剂盒组成包括：96孔酶标板、酶标二抗、抗体工作液、标准品溶液、底物显色液、终止液、浓缩洗涤液、浓缩复溶液、2-硝基苯甲醛、盖板膜、自封袋、说明书和质检报告。采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被偶联抗原，样本中残留的呋喃它酮代谢物将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗呋喃它酮代谢物抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光度值与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中呋喃它酮代谢物的残留量。与仪器分析技术相比具有操作简便、费用低廉、灵敏度高等特点。但是这种方法不利于现场测试。 

实用新型内容

本实用新型的目的在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种操作简便、灵敏性强，定量准确，检测速度快的呋喃它酮代谢物荧光定量检测检测系统，包括一种呋喃它酮代谢物荧光定量检测免疫层析试剂盒，配合系统中的荧光定量检测仪使用，可实现对呋喃它酮的精确定量。 

为实现上述目的，本实用新型采取了以下技术方案： 

呋喃它酮代谢物荧光定量检测系统，包括呋喃它酮代谢物荧光定量检测免疫层析试剂盒和荧光定量检测仪。所述试剂盒包括呋喃它酮代谢物荧光定量检测免疫层析试纸条和荧光标记液；所述荧光定量检测仪包括荧光光源系统及荧光检测系统。 

其中，所述呋喃它酮代谢物荧光定量检测免疫层析试剂盒，包括试纸条和荧光标记液，所述试纸条由样品垫、硝酸纤维素包被膜、吸水纸顺次搭接粘贴在底板上构成；所述硝酸纤维素包被膜包括检测区和质控区，所述检测区包被有呋喃它酮代谢物AMOZ抗原；所述质控区包被有抗鼠IgG抗体；所述荧光标记液中含有荧光标记AMOZ抗体和荧光标记鼠IgG抗体。 

所述荧光标记液的激发波长(Ex)为310-550nm，发射波长(Em)为340-620nm。