[发明专利]提供或调节甜味的组合物和方法及其筛选方法

权利要求书

1.一种鉴定在口腔内提供或增强甜味的分子的方法，所述方法包括：

(a)将测试分子与体外培养环境下通过ATP-门控K+通道(K_ATP)表达磺酰脲受体(SUR)和内向整流钾通道(Kir)的哺乳动物细胞或细胞系接触；

(b)在接触的细胞或细胞系中测量K_ATP通道的电生理或功能活性；其中，与阴性对照细胞或细胞系相比，接触测试分子的细胞或细胞系中K_ATP的电生理或功能性活性降低或抑制可鉴定提供或增强甜味的测试分子。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述SUR是SUR1。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述Kir是KIR6.1。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞或细胞系是口腔味觉细胞或口腔味觉细胞系。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞或细胞系是表达K_ATP通道的异源细胞。

6.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述细胞或细胞系是工程改造成表达K_ATP通道的转化细胞或细胞系。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述细胞或细胞系是内分泌细胞系。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述电生理活性是细胞或细胞系的极化或去极化或特定离子指示剂或通量的变化。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：

(c)对测试分子进行相反筛选测试以排除测试分子介导的非特异性K⁺电生理活性。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：

(d)使测试分子接受用于甜味的动物生理反应试验、电生理反应试验、或行为试验或者经分离味觉细胞、经分离味蕾或味切片的钙成像。

11.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述阴性对照包括与对照分子接触的相同细胞或细胞系，对照分子已知不在口腔内提供或增强甜味。

12.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述阴性对照包括不与测试或对照分子接触的相同细胞或细胞系。

13.一种在口腔内提供或增强甜味的组合物，所述组合物包括如权利要求1-12中任一项所述方法鉴定的测试分子。

14.一种鉴定在口腔内提供或增强甜味的分子的方法，所述方法包括：

(a)将测试分子与体外培养条件下表达糖转运体的哺乳动物细胞或细胞系接触；和

(b)测量所接触细胞或细胞系的糖-转运体的表达水平或功能活性；

其中，与阴性对照细胞或细胞系相比，接触测试分子的细胞或细胞系中糖转运体蛋白的蛋白表达或功能活性增加可鉴定出一种提供或增强甜味的测试分子。

15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述表达水平是糖-转运体mRNA的水平。

16.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述表达水平是糖-转运蛋白的水平。

17.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述表达糖-转运体的细胞或细胞系是表达糖-转运体的口腔味觉细胞或口腔味觉细胞系。

18.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述表达糖-转运体的细胞或细胞系是表达糖-转运体的异源细胞。

19.如权利要求17或18所述的方法，其特征在于，所述表达糖-转运体的细胞或细胞系是工程改造成表达糖-转运体的转化细胞或细胞系。

20.如权利要求19所述的方法，其特征在于，所述表达糖-转运体的细胞系是内分泌细胞系。

21.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述表达糖-转运体的细胞或细胞系是表达味觉信号蛋白的任意细胞或细胞系。

22.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述功能活性是主动转运活性或被动、易化转运活性。

23.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述功能活性是葡萄糖或钠的摄入或转运。