[发明专利]丝氨酸、苏氨酸的翻译后修饰解析用标记剂有效
申请号: | 201280009068.5 | 申请日: | 2012-02-16 |
公开(公告)号: | CN103502818A | 公开(公告)日: | 2014-01-08 |
发明(设计)人: | 篠原康郎;武川泰启;藤谷直树;古川润一;坂井秀昭 | 申请(专利权)人: | 创革医疗科技有限公司;国立大学法人北海道大学 |
主分类号: | G01N33/58 | 分类号: | G01N33/58;G01N30/88;G01N33/66;G01N33/68 |
代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人: | 刘新宇;李茂家 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 丝氨酸 苏氨酸 翻译 修饰 解析 标记 | ||
1.一种标记剂,其在碱性条件下,从接受了翻译后修饰的糖蛋白和/或糖肽的丝氨酸残基和/或苏氨酸残基选择性切断翻译后修饰基,对丝氨酸残基、苏氨酸残基和该从氨基酸残基切断的翻译后修饰基中的至少一种进行标记。
2.根据权利要求1所述的标记剂,其中,标记剂包含吡唑啉酮衍生物、异噁唑酮衍生物、乙内酰脲衍生物、罗丹宁衍生物、马来酰亚胺衍生物中的至少一种作为有效成分。
3.根据权利要求1、2的任一项所述的标记剂,其中,吡唑啉酮衍生物为3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮、1,3-二甲基-吡唑啉酮、3-甲基-1-对甲苯基-5-吡唑啉酮中的任一种或两种以上的组合。
4.根据权利要求1~3的任一项所述的标记剂,其中,翻译后修饰基为O-磷酸基、O-硫酸基、O-聚糖的任一种或两种以上的修饰基。
5.根据权利要求1~4的任一项所述的标记剂,其中,O-聚糖是由N-乙酰半乳糖胺、甘露糖、岩藻糖、N-乙酰葡糖胺、木糖、葡萄糖中的任一者作为与O原子结合的糖而起始的聚糖。
6.根据权利要求1~5的任一项所述的标记剂,其中,O-聚糖是由N-乙酰半乳糖胺、甘露糖、岩藻糖、木糖、葡萄糖中的任一者作为与O原子结合的糖而起始并进一步结合糖而延伸的聚糖。
7.一种翻译后修饰基的切断方法,其中,将被检测物质的糖蛋白和/或糖肽与权利要求1~6的任一项所述的标记剂溶解或分散于溶剂中,在碱性条件下进行加热,由此从被检测物质的丝氨酸残基和/或苏氨酸残基选择性切断翻译后修饰基并将其标记。
8.根据权利要求7所述的翻译后修饰基的切断方法,其中,在切断的同时,翻译后修饰基被标记。
9.根据权利要求7、8的任一项所述的翻译后修饰基的切断方法,其中,在分离的同时,丝氨酸残基和/或苏氨酸残基被标记。
10.根据权利要求7~9的任一项所述的翻译后修饰基的切断方法,其中,在使糖蛋白和/或糖肽与标记剂溶解在水中的条件下进行。
11.根据权利要求7~10的任一项所述的翻译后修饰基的切断方法,其中,与标记剂一起利用硫醇化合物。
12.根据权利要求11所述的翻译后修饰基的切断方法,其中,硫醇化合物为二硫苏糖醇。
13.根据权利要求7~12的任一项所述的翻译后修饰基的切断方法,其中,标记剂为吡唑啉酮衍生物。
14.一种翻译后修饰基的解析方法,其特征在于,对于用权利要求7~13的任一项所述的方法从被检测物质的丝氨酸残基和/或苏氨酸残基将翻译后修饰基切断并标记的该翻译后修饰基,进行液相色谱分析和/或质谱分析。
15.一种翻译后修饰基的解析方法,其特征在于,对于用权利要求7~13的任一项所述的方法从被检测物质的丝氨酸残基和/或苏氨酸残基将翻译后修饰基切断并标记的被检测物质,进行液相色谱分析和/或质谱分析。
16.一种翻译后修饰基的解析方法,其特征在于,同时进行权利要求14、15的解析。
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