[发明专利]ADAM6小鼠

权利要求书

1.一种小鼠，其具有包含免疫球蛋白重链基因座的修饰的基因组，其中所述修饰降低或消除了内源ADAM6功能，并且所述小鼠进一步包含编码小鼠ADAM6蛋白或其直系同源物或同源物或所述对应ADAM6蛋白的功能片段的核酸序列。

2.根据权利要求1所述的小鼠，其中所述核酸序列被放置在异位位置处。

3.根据权利要求1或2所述的小鼠，其中所述核酸序列位于内源免疫球蛋白基因座处。

4.根据权利要求1或2所述的小鼠，其中所述核酸序列被整合到所述小鼠基因组中非内源免疫球蛋白基因座的位置处。

5.根据权利要求1至4中任一权利要求所述的小鼠，其中所述免疫球蛋白重链基因座的修饰包括放置一个或多个人免疫球蛋白基因序列。

6.根据权利要求1至4中任一权利要求所述的小鼠，其中所述免疫球蛋白重链基因座的修饰包括用一个或多个人免疫球蛋白基因序列置换小鼠免疫球蛋白重链基因座中的一个或多个序列。

7.根据权利要求6所述的小鼠，其中所述免疫球蛋白重链基因座的修饰包括用一个或多个人重链V(V_H)基因区段置换一个或多个内源重链V(V_H)基因区段。

8.根据权利要求1所述的小鼠，其中所述免疫球蛋白重链基因座的修饰包括用人重链可变基因序列置换内源重链可变基因序列。

9.根据权利要求1至8中任一权利要求所述的小鼠，其中所述核酸序列编码小鼠ADAM6a蛋白和/或ADAM6b蛋白或其直系同源物、同源物或功能片段。

10.一种用于修饰小鼠的免疫球蛋白重链基因座的方法，其包括：

(a)对所述小鼠免疫球蛋白重链基因座进行第一修饰，导致雄性小鼠中的内源小鼠ADAM6活性的降低或消除；和

(b)对所述小鼠进行第二修饰，以添加赋予所述小鼠在雄性小鼠中发挥功能的ADAM6活性的核酸序列。

11.根据权利要求10所述的方法，其中步骤(b)中的核酸序列被添加在异位位置。

12.根据权利要求10或11所述的方法，其中所述第一修饰包括放置一个或多个人免疫球蛋白基因序列。

13.根据权利要求10或11所述的方法，其中所述第一修饰包括用一个或多个人免疫球蛋白基因序列置换所述小鼠免疫球蛋白重链基因座中的一个或多个序列。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述第一修饰包括用一个或多个人V_H基因区段置换一个或多个内源V_H基因区段。

15.根据权利要求10所述的方法，其中所述第一修饰包括用人重链可变基因序列置换内源重链可变基因序列。

16.根据权利要求10至15中任一权利要求所述的方法，其中所述第一修饰和所述第二修饰同时进行。

17.一种小鼠，其可由根据权利要求10至16中任一权利要求所述的方法获得。

18.一种分离细胞，其来自于根据权利要求1至9和17中任一权利要求所述的小鼠。

19.一种分离组织，其来自于根据权利要求1至9和17中任一权利要求所述的小鼠。

20.一种根据权利要求1至9和17中任一权利要求所述的小鼠用于产生人-小鼠反转嵌合抗体、完全人抗体、完全人Fab片段和/或完全人F(ab)₂片段的用途。

21.一种用于产生针对抗原具有特异性的反转嵌合小鼠-人抗体的方法，其包括以下步骤：

a)用所述抗原对根据权利要求1至9和17中任一权利要求所述的小鼠进行免疫；

b)从所述小鼠分离产生针对所述抗原具有特异性的反转嵌合小鼠-人抗体的至少一种细胞；和

c)培养步骤b)的产生抗体的至少一种细胞，并获得所述抗体。

22.根据权利要求21所述的方法，其中步骤c)中的培养是在从步骤b)中获得的所述至少一种细胞产生的至少一种杂交瘤细胞上进行的。