[发明专利]细胞因子产生细胞片及其利用方法

权利要求书

1.一种细胞片或其的层叠体，其特征在于，所述细胞片具有产生与促进血管新生有关的细胞因子的能力，构成所述细胞片的细胞中至少包含有成纤维细胞，并且包含骨骼肌成肌细胞10%以上。

2.根据利要求1所述的细胞片或其的层叠体，其中，成纤维细胞来源于骨骼肌肌肉组织。

3.根据权利要求1、2的任一项所述的细胞片或该细胞片的层叠体，其中，以75%～25%的比例含有骨骼肌成肌细胞，细胞因子为血管内皮细胞增殖因子（VEGF）和/或肝细胞增殖因子（HGF）。

4.一种细胞片或该细胞片的层叠体，通过在进行接种的血管内皮细胞上重叠权利要求1～3的任一项所述的细胞片或细胞层叠体而构建血管内皮细胞网络。

5.根据权利要求1～4的任一项所述的细胞片或该细胞片的层叠体，其中，该细胞从生物体组织中提取。

6.根据权利要求1～5的任一项所述的细胞片或该细胞片的层叠体，其中，选自骨骼肌成肌细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞的至少一种细胞来源于自体组织。

7.根据权利要求1～6的任一项所述的细胞片或该细胞片的层叠体，其中，细胞为进行了荧光标记的细胞。

8.一种权利要求1～7的任一项所述的细胞片的制造方法，其特征在于，在表面覆盖有水合力在0～80℃的温度范围内变化的聚合物的细胞培养支撑体上，在聚合物的水合力弱的温度区域培养该细胞，其后，使培养液变化至聚合物的水合力变强的状态的温度而使培养的细胞以片状剥离。

9.一种权利要求1～7的任一项所述的细胞片的制造方法，其中，每1层细胞片所接种的细胞为1.0×10⁵～7.0×10⁵个／cm²。

10.一种权利要求1～7的任一项所述的细胞片层叠体的制造方法，其特征在于，将剥离的细胞片进一步层叠在其他的片状培养细胞上，或者重复该操作而将细胞片层叠。

11.一种权利要求8～10的任一项所述的细胞片或该细胞片的层叠体的制造方法，其中，剥离方法中，不实施通过蛋白质分解酶进行的处理而由细胞培养支撑体剥离。

12.一种权利要求8～11的任一项所述的细胞片或该细胞片的层叠体的制造方法，其中，剥离方法为如下方法：在培养结束时，在培养细胞上紧贴载体，与载体一起剥离。

13.一种权利要求8～12的任一项所述的细胞片或该细胞片的层叠体的制造方法，其中，水合力在0～80℃的温度范围内变化的聚合物为聚（N-异丙基丙烯酰胺）。

14.根据权利要求1～7的任一项所述的细胞片或该细胞片的层叠体，其用于将得到的细胞片或该细胞片的层叠体移植入生物体内的心脏的用途。

15.根据权利要求14所述的细胞片或该细胞片的层叠体，其中，将得到的细胞片或该细胞片的层叠体用于以下用途：选自由心力衰竭、缺血性心脏病、心肌梗塞、心肌病、心肌炎、肥大型心肌病、扩张期肥大型心肌病和扩张型心肌病组成的组的至少一种心脏的疾患或障碍的治疗，或者心肌壁重建的移植。